土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書



可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC4000
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入4 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑-20℃分裝保存4周；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：5 mmol/L的對(duì)硝基 苯* 溶液。

產(chǎn)品說(shuō)明：
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是土壤微生物分泌的溶酶體中的一種酸性水解酶。其活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
S-NAG分解對(duì)硝基 苯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對(duì)-硝基 苯*，后者在400nm有最大吸收峰，通過測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算NAG活性。


注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、30-50目篩、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
當(dāng)ΔA大于1時(shí)，建議將上清液稀釋后進(jìn)行測(cè)定；當(dāng)ΔA小于0.02時(shí)，建議延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間。計(jì)算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)或注意反應(yīng)時(shí)間變化。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取兩管0.1g三葉草土，即為測(cè)定管和對(duì)照管，按照測(cè)定步驟操作，記為A測(cè)定管、A對(duì)照管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.509-0.434=0.075，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.604-0.002=0.602，計(jì)算酶活得：S-NAG活力（U/g 土樣）=1.44×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=1.44×0.075÷0.602÷0.1=1.79402 U/g 土樣。

2. 取兩管0.1g林土樣，即為測(cè)定管和對(duì)照管，按照測(cè)定步驟操作，記為A測(cè)定管、A對(duì)照管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.574-0.497=0.077，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.604-0.002=0.602，計(jì)算酶活得：S-NAG活力（U/g 土樣）=1.44×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=1.44×0.077÷0.602÷0.1=1.84186 U/g 土樣。

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