總抗氧化能力（T-AOC）檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：BC1310
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液：使用前置于4℃冰箱或冰上預(yù)冷；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg FeSO₄·7H₂O。臨用前加入0.9 mL蒸餾水，20μL濃硫酸，配制成40 µmol/mL FeSO₄標(biāo)準(zhǔn)溶液備用；

3. 混合液：將試劑一、試劑二、試劑三按7:1:1的比例混合，現(xiàn)配現(xiàn)用，用多少配多少。使用前置于37℃水浴鍋或37℃恒溫培養(yǎng)箱中預(yù)熱10min。

產(chǎn)品說(shuō)明：
測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿、血清、唾液、尿液等各種體液，細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

在酸性環(huán)境下，還原Fe³⁺-三吡啶三吖嗪（Fe³⁺-TPTZ）產(chǎn)生藍(lán)色的Fe²⁺-TPTZ的能力反映了總抗氧化能力。


技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.00056 μmol/mL
線性范圍：0.00078125-0.05 μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、細(xì)胞超聲破碎儀、研缽/勻漿器、濃硫酸、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

1. 試劑二對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴乳膠手套操作。

2. 盡量避免使用在酸性條件下呈藍(lán)色或接近藍(lán)色的樣本，否則對(duì)本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生干擾。

3. 樣本中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢劑和DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應(yīng)的還原劑。

4. 如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g三葉草葉片加入1mL預(yù)冷的提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白=0.909-0.148=0.761，帶入標(biāo)曲y=21.056x-0.0087，得出x=0.037，按樣本質(zhì)量計(jì)算得：

總抗氧化能力（μmol/g質(zhì)量）=34×x÷W=34×0.037÷0.1=12.58 μmol/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. An W, Zhang Y, Zhang X, et al. Ocular toxicity of reduced graphene oxide or graphene oxide exposure in mouse eyes[J]. Experimental eye research, 2018, 174: 59-69.

2. Zhang S, He Y, Sen B, et al. Alleviation of reactive oxygen species enhances PUFA accumulation in Schizochytrium sp. through regulating genes involved in lipid metabolism[J]. Metabolic engineering communications, 2018, 6: 39-48.

3. Liu S, You L, Zhao Y, et al. Wild Lonicera caerulea berry polyphenol extract reduces cholesterol accumulation and enhances antioxidant capacity in vitro and in vivo[J]. Food Research International, 2018, 107: 73-83.

4. Z Zhang,H Liu,C Sun,et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice. Journal of plant Physiology. October 2018; 100-110.(IF7.394)

5. Esmail S. Kakey,Amez A. Ismael. Evaluation of Oxidative Stress Status in Aged Human in relation to some Diseases. International Conference on Pure and Applied Sciences. August 2018

參考文獻(xiàn)：

1. Pellegrini N, Serafini M, Salvatore S, et al. Total antioxidant capacity of spices, dried fruits, nuts, pulses, cereals

and sweets consumed in Italy assessed by three different in vitro assays[J]. Molecular nutrition & food research, 2006, 50(11): 1030-1038.

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