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更新時(shí)間:2022-08-06 20:59:22瀏覽次數(shù):1910評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10ml |
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貨號(hào) | P1015 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。 |
蛋白質(zhì)電泳試劑4×蛋白上樣緩沖液(含DTT)
貨號(hào): P1015
規(guī)格: 10ml
保存: -20℃保存,建議分裝凍存,避免反復(fù)凍融,自發(fā)貨之日起少 12 個(gè)月有效。
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品適用于 SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為 SDS,DTT,溴酚藍(lán),緩沖鹽溶液等。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被 SDS 掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異;SDS 還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。DTT 可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。
聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑N,N-甲叉雙丙烯酰胺在加速劑N,N,N,N—四甲基乙二胺(簡稱TEMED)和催化劑過硫酸銨(簡稱AP)或核黃素(即vitamin B2)的作用下聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠,以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳
(polyacrylamide gel electrophoresis,簡稱PAGE)
SDS-PAGE是在要電泳的樣品中加入含有SDS和β-巰基乙醇(或者DTT)的樣品處理液,SDS可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。SDS還與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)各種蛋白質(zhì)分子本身的電荷*被SDS掩蓋。這樣電泳時(shí),就消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷及結(jié)構(gòu)上的差異,電泳速度只是與蛋白質(zhì)分子量有關(guān)。用本法測定蛋白質(zhì)的分子量只需根據(jù)待測蛋白質(zhì)在已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)圖中的位置,就能得知分子量。
使用說明:
1、請(qǐng)按每 30 微升蛋白樣品加入 10 微升上樣緩沖液的比例(4 倍稀釋)來使用。如果蛋白濃度過高,可用雙蒸水稀釋。
2、混勻后,100℃水浴加熱 5-10 分鐘,使蛋白變性。
3、冷卻室溫后,10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘,取上清直接上樣電泳即可。
注意事項(xiàng):
1、聚丙烯酰胺凝膠濃度為 8%時(shí)溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在 30kd 左右, 膠濃度為 12%時(shí),約在 20kd左右,膠濃度為 15%時(shí),大概在 10kd。請(qǐng)根據(jù)自己目標(biāo)條帶來判斷結(jié)果電泳時(shí)間。
2、本試劑因含 DTT,有一定的毒性,為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
相關(guān)產(chǎn)品:
P1016 4× 蛋白上樣緩沖液(含 β- 巰基乙醇)
P1018 2× 蛋白上樣緩沖液(含 DTT )
P1017 4× 非變性蛋白上樣緩沖液
A1030 10% 過硫酸氨
A1010 30% 丙烯酰胺 (29:1)
P0012 10× 麗春紅染色液
P1300-500 考馬斯亮藍(lán)快速染色液
P1300 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒
PR1700 預(yù)染次高分子量蛋白 MARKER
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參考文獻(xiàn):
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《Profile of melatonin and its receptors and synthesizing enzymes in cumulus–oocyte complexes of the developing sheep antral follicle—a potential estradiol-mediated mechanism》 作者:Longfei Xiao, Junjie Hu, Liangli Song, Yong Zhang, Weitao Dong, Yuting Jiang, Quanwei Zhang, Ligang Yuan and Xingxu Zhao 期刊:Reproductive Biology and Endocrinology 影響因子:2.852 PMID:30606208
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang,Ruo‐Lun Wei,Wei Du,Li‐Wei Zhang,Tao Du,Ya‐Dong Geng,Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影響因子:3.394 PMID:30924320
《Lysophosphatidic acid induces the migration and invasion of SGC-7901 gastric cancer cells through the LPA2 and Notch signaling pathways》 作者:Zhiheng Ren, Chenli Zhang, Linna Ma ,Xiao Zhang ,Shuxia Shi ,Deng Tang, Jinyu Xu ,Yan Hu ,Binsheng Wang ,Fangfang Zhang , Xu Zhang, Haixue Zheng 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:31115486
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