非蛋白質(zhì)巰基含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：BC1430
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液的配制：將提取液一和提取液二按體積比1：1的比例混合配制，按照樣本數(shù)量配制并在當(dāng)天用完；

2. 試劑二：臨用前加入5 mL無(wú)水甲醇充分溶解備用，2-8℃保存八周；

3. 標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg半胱*酸，臨用前加入1.65 mL提取液配制成50 µmol/mL的半胱*酸標(biāo)準(zhǔn)溶液備用，2-8℃保存1個(gè)月。

產(chǎn)品說(shuō)明：
生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能，對(duì)生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。

巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-*甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成黃色化合物，在412nm處有最大吸收峰。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0007 μmol/mL
線性范圍：0.003125-0.3 μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、甲醇、研缽/勻漿器、超聲破碎儀、冰和蒸餾水.

操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：
如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g小鼠腎臟加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.791-0.033=0.758，帶入標(biāo)曲y=3.4566x+0.159，得出x=0.1733，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：

非蛋白質(zhì)巰基含量（µmol/g質(zhì)量）= x÷W=0.1733÷0.1=1.733 µmol/g 質(zhì)量。
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