丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 常量法

產(chǎn)品名稱：丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品英文名：Malondialdehyde (MDA) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BC0020                          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣                     產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：500
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字：丙二醛試劑盒 

簡(jiǎn)要介紹：
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸，生成過(guò)氧化脂質(zhì)；后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物，其中包括MDA。通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。
MDA與硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid，TBA)縮合，生成紅色產(chǎn)物，在532nm有大吸收峰，進(jìn)行比色后可估測(cè)樣品中過(guò)氧化脂質(zhì)的含量；同時(shí)測(cè)定600nm下的吸光度，利用532nm與600nm下的吸光度的差值計(jì)算MDA的含量。
產(chǎn)品詳細(xì)描述

商品貨號(hào)：	商品品牌：	規(guī)格	基本售價(jià)：	選擇規(guī)格
BC0020-50管/48樣	Solarbio	50管/48樣	500.00元

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：                                       
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸，生成過(guò)氧化脂質(zhì)；后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合 物，其中包括 MDA。通過(guò)檢測(cè) MDA 的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。
測(cè)定原理： 
MDA 與硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid，TBA)縮合，生成紅色產(chǎn)物，在 532nm有大吸收 峰，進(jìn)行比色后可估測(cè)樣品中過(guò)氧化脂質(zhì)的含量；同時(shí)測(cè)定 600nm下的吸光度，利用532nm 與 600nm下的吸光度的差值計(jì)算 MDA 的含量。  
需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾 水。

試劑的組成和配置：
提取液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；
注意事項(xiàng)： 臨用前注意試劑一是否*溶解，如未溶解，可以70℃加熱，并振蕩以促進(jìn)溶解。

MDA 提取：  
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量 （104個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提 取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù)30 次）； 8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織， 加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

測(cè)定步驟： 
1、吸取 0.6mL 試劑一于 1.5mL離心管中，再加入 0.2mL樣本, 混勻。
2、95℃水浴中保溫 30min（蓋緊，防止水分散失），置于冰浴中冷卻，10000g，25℃，離心 10min。
3、吸取上清液于 1mL玻璃比色皿中，測(cè)定 532nm和 600nm處的吸光度，記為 A532和 A600， ΔA= A532-A600。

MDA 含量計(jì)算： 

1. 血清（漿）中 MDA 含量的計(jì)算：

 MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣=25.8×ΔA  
2、細(xì)菌、細(xì)胞或動(dòng)物組織中 MDA 含量計(jì)算
（1）按照蛋白濃度計(jì)算 MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 樣)=25.8× ΔA ÷Cpr 需要另外測(cè)定，建議使用本公司 BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。
（2）按照樣品質(zhì)量計(jì)算 MDA 含量(nmol/g 鮮重)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總)=25.8×ΔA ÷W
 (3 ) 按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
 MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總)=0.0516×ΔA
V 反總：反應(yīng)體系總體積， 8×10-4 L；ε：丙二醛摩爾消光系數(shù)，155×103 L / mol /cm；d： 比色皿光徑，1cm；V 樣：加入樣本體積，0.2 mL；V 樣總：加入提取液體積，1 mL；Cpr： 樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500 萬(wàn)。

丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 常量法