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更新時(shí)間:2024-08-12 21:00:06
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糖原含量檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:340
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 糖原檢測(cè)試劑盒|糖原含量檢測(cè)試劑盒|糖原|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:
糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖,是糖的主要的儲(chǔ)存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度,當(dāng)血糖升高時(shí)可在肝臟合成糖原,血糖降低時(shí),肝糖原則分解為葡萄糖以補(bǔ)充血糖。因此,肝糖原對(duì)維持血糖的相對(duì)平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲(chǔ)存形式,在劇烈運(yùn)動(dòng)消耗大量血糖時(shí),肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:0.1mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶, 4℃保存;
產(chǎn)品說明:
糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖,是糖的主要的儲(chǔ)存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度,當(dāng)血糖升高時(shí)可在肝臟合成糖原,血糖降低時(shí),肝糖原則分解為葡萄糖以補(bǔ)充血糖。因此,肝糖原對(duì)維持血糖的相對(duì)平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲(chǔ)存形式,在劇烈運(yùn)動(dòng)消耗大量血糖時(shí),肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>
測(cè)定原理:蒽酮法。利用強(qiáng)堿性提取液提取糖原,在強(qiáng)酸性條件下利用蒽酮顯色劑測(cè)定糖原含量。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量比色皿/96 孔板、濃硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
操作步驟:
1﹑細(xì)胞或細(xì)菌:收集500~1000 萬細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;加入0.75mL 提取液超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30 次);轉(zhuǎn)移10mL 試管中,置于沸水浴中煮沸20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1 次,使充分混勻;取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5mL,混勻,待測(cè)。
2﹑組織:稱取0.1~0.2g 樣品,置于10mL試管中;加入0.75mL提取液,置于沸水浴中煮沸20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1 次,使充分混勻;待組織全部溶解后,取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5mL,混勻,待測(cè)。
試劑 | 空白管(μL) | 標(biāo)準(zhǔn)管(μL) | 測(cè)定管(μL) |
待測(cè)樣本 | 60 | ||
試劑一 | 60 | ||
蒸餾水 | 60 | ||
試劑二 | 240 | 240 | 240 |
混勻,置沸水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻,于620nm 波長(zhǎng)處,分別讀取空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管吸光度,分別記為A1、A2 和A3。
注意:1、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要測(cè)一次。
2、如果A3-A1 大于2,需要將樣本用蒸餾水稀釋,計(jì)算公式中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
糖原(mg/g 鮮重)=1.11×(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
糖原(mg/mg prot)=1.11×(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷Cpr
3、按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
糖原(mg/104 cell)=1.11×(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量×V1÷V2)
= 0.555×(A3-A1)÷(A2-A1)÷細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
1.11:是此法測(cè)得葡萄糖含量換算為糖原含量的常數(shù),即111μg 糖原用蒽酮試劑顯色相當(dāng)于100μg 葡萄糖用蒽酮所試劑顯示的顏色;C 標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.1mg/mL;V1:加入反應(yīng)體系中糖原提取液體積,0.25mL;V2:提取液體積,5mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量:以104為單位,萬個(gè)。
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