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貨物所在地:北京北京市
所在地: 北京
更新時(shí)間:2024-08-12 21:00:06
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游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒 代謝
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 :
FFA 既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。血清中 FFA 的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。游離脂肪酸的濃度會(huì)因?yàn)樘悄虿?、重癥肝障礙、甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病而上升。
FFA 能與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽;利用銅試劑法測(cè)定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、無水乙醇和雙蒸水。
產(chǎn)品內(nèi)容 :
試劑一×1 瓶,用 30ml 雙蒸水充分溶解,4℃保存;
試劑二×1 瓶,臨用前,按液體一: :液體二=49:49:2 的比例配制試劑二;
試劑三×1 瓶,臨用前,按液體三:液體四:液體五=2:1:17 的比例配制試劑三;
試劑四×2 瓶,臨用前,取 6ml 無水乙醇充分溶解 1 支試劑四,待溶解后,加入0.12ml 稀釋 10 倍后液體四,充分混勻;
標(biāo)準(zhǔn)品×1 支,臨用前配制,向標(biāo)準(zhǔn)品中加 1ml 充分溶解,然后取該溶液,用稀釋 100 倍,即為 500µmol/L 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
操作步驟 :
一 、 FFA 的 提取 :
1、血液中 FFA 測(cè)定:將所取血液,室溫靜置 1 h 后,于 4 ℃ 離心機(jī) 3500 rpm 離心 15min,取上層血清置于-20℃冰箱保存,待測(cè)
2、組織中 FFA 含量測(cè)定:組織用生理鹽水沖洗干凈后,用吸水紙吸取表面水分,制成 10%的勻漿,8000rpm,4℃離心 10min,取上清,待測(cè)。
二 、 FFA 含量的測(cè)定 :
按下表操作:
空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 待測(cè)管 | |
試劑一(μl) | 500 | 500 | 500 |
雙蒸水(μl) | 50 | / | / |
500μmol/l的標(biāo)準(zhǔn)液(μl) | / | 50 | / |
待測(cè)液(μl) | / | / | 50 |
試劑二(μl) | 2500 | 2500 | 2500 |
試劑三(μl) | 800 | 800 | 800 |
試劑四(μl) | 200 | 200 | 200 |
振蕩混勻2min,4000rpm離心10min,取下層溶液2ml | |||
振蕩混勻2min,4000rpm離心10min,取下層溶液1ml |
按照上表依次加入各試劑, 在加試劑四混勻后, 室溫靜止 15min, 立即于 550nm 處比色, 30min 內(nèi)完成比色,記錄吸光值。
FFA 含量 計(jì)算 :
1、 血液中 FFA 含量計(jì)算(µmol/L)
2、 組織中 FFA 含量計(jì)算(µmol/g mass)
注意事項(xiàng) :
1、 試劑盒中多種試劑均須臨用前配制,根據(jù)需要量配制試劑;試劑五須在加入前 20min 內(nèi)配制。
2、 配制試劑及測(cè)定過程中盡量戴手套和口罩。
3、 加試劑五后確保靜置 15min 后測(cè)定,并在 30 內(nèi) min 完成測(cè)定。
4、 該試劑盒不可用塑料比色皿和 96 孔板測(cè)定,需用玻璃比色皿。
5、 由于無水乙醇不便于運(yùn)輸,該試劑盒中未提供無水乙醇,請(qǐng)自己準(zhǔn)備。
6、 試劑四配制應(yīng)盡量晚配,可在操作到加入試劑三時(shí),再配制試劑四。
游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒 代謝
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