谷氨酰胺合成酶（GS）測試盒 氮代謝

貨號：BC0910

規(guī)格：50管/24樣

測定意義：GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。

測定原理：GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?；惲u肟酸，在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物；該絡(luò)合物在540nm 處有大吸收峰，可用分光光度計(jì)測定。

所需的儀器和用品：可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一、樣本測定的準(zhǔn)備
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10 4 個(gè)）：
提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 提取液），超聲波破
碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30 次）；8000g 4℃離心10min，
取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入
1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
二、測定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長540nm，蒸餾水調(diào)零。

GS 活力單位的計(jì)算
1. 血清（漿）GS 活性
單位定義：每mL 血清（漿）在每mL 反應(yīng)體系中每min 使540 下吸光值變化0.01 定義為一個(gè)
酶活力單位。
計(jì)算公式：GS（U/mL）=ΔA×V 反總÷V 樣÷0.01÷T =19×ΔA
2. 組織、細(xì)菌或細(xì)胞GS 活性
（1） 按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg 組織蛋白在每mL 反應(yīng)體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為一
個(gè)酶活力單位。
GS（U/mg prot）＝ΔA×V 反總÷（Cpr×V 樣）÷0.01÷T =19×ΔA÷Cpr
（2） 按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g 組織在每mL 反應(yīng)體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為一個(gè)酶
活力單位。
GS（U/g 鮮重）＝ΔA×V 反總÷(W× V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T =19×ΔA÷W
（3） 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位定義：每1 萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每mL 反應(yīng)體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為
一個(gè)酶活力單位。
GS（U/10 4 cell）＝ΔA×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T =0.038×ΔA
V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.8mL； V 樣：加入樣本體積，0.14mL；V 樣總：加入提取液體
積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌
或細(xì)胞總數(shù)，500 萬。

谷氨酰胺合成酶（GS）測試盒 氮代謝訂購說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后，將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

運(yùn)輸說明：

極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。