谷氨酰胺合成酶(GS)活性檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品名稱: 谷氨酰胺合成酶(GS)活性檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名: Micro Glutamine Synthetase（GS）Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC0915           產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：720
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: ：  谷氨酰胺合成酶檢測(cè)試劑盒|GS檢測(cè)試劑盒|谷氨酰胺合成酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不僅可以防止過多的銨離子對(duì)生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。
    GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?；惲u肟酸，在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物；該絡(luò)合物在540nm 處有大吸收峰，可用分光光度計(jì)測(cè)定。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體10mL×1瓶，-20℃保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，-20℃保存。
試劑三： 粉劑×2瓶，-20℃保存。用時(shí)每瓶加入5mL雙蒸水充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存。
試劑四：液體15mL×1瓶，4℃保存。

產(chǎn)品說明：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不僅可以防止過多的銨離子對(duì)生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。
    GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?；惲u肟酸，在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物；該絡(luò)合物在540nm 處有大吸收峰，可用分光光度計(jì)測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)需自備的儀器和用品：
 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟

• 樣品測(cè)定的準(zhǔn)備

稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
 

• 測(cè)定操作表

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)540nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 在EP 管中加入下列試劑：

混勻，靜置10min 后，5000g，常溫離心10min，取上清液測(cè)定540nm 處的吸光值A?！?/span>A=A測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。


三、計(jì)算
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每min 使540nm下吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（U/mg prot）＝ΔA×V反總÷（Cpr×V樣）÷0.01÷T =19×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織在反應(yīng)體系中每30min 使540nm下吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（U/g 鮮重）＝ΔA×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷0.01÷T =19×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，400µL； V樣：加入樣本體積，70µL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每min 使540nm下吸光值變化0.005定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（U/mg prot）＝ΔA×V反總÷（Cpr×V樣）÷0.01÷T =38×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織在反應(yīng)體系中每30min 使540nm下吸光值變化0.005定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（U/g 鮮重）＝ΔA×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷0.01÷T =38×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，400µL； V樣：加入樣本體積，70µL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；

相關(guān)文獻(xiàn)：
《Possible roles of?glutamine synthetase in?responding to?environmental changes in?a?scleractinian coral》 作者:Yilu?Su,Zhi?Zhou,Xiaopeng?Yu 期刊:Molecular Biology Reports  影響因子:2.107 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:30666245
《Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture》 作者:Shan Li, Yonghang Tian, Kun Wu, Yafeng Y, Jianping Yu, Jianqing Zhang, Qian Liu, Mengyun Hu, Hui Li, Yiping Tong,Nicholas P. Harberd4 & Xiangdong Fu 期刊:Nature 影響因子:43.07 PMID:30111841
《Reduced Glutamine Synthetase Activity Alters the Fecundity of Female  (Hendel).》 作者:Dong Wei 1,2OrcID, Meng-Yi Zhang 1,2, Ying-Xin Zhang 1,2, Su-Yun Zhang 1,2, Guy Smagghe 1,2,3OrcID and Jin-Jun Wang 期刊:Insects 影響因子:2.139 PMID:31252564

 

谷氨酰胺合成酶(GS)活性檢測(cè)試劑盒 微量法