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酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳技術(shù)

時(shí)間:2019-6-30閱讀:1212
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酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳技術(shù)

  • 抗原對流免疫電泳電泳的原理

酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳時(shí),將酶標(biāo)記抗原代替未標(biāo)記抗原,在堿性條件下,凝膠內(nèi)酶標(biāo)記抗原向正極移動(dòng),抗體在內(nèi)滲液流作用下慢慢向負(fù)極移動(dòng),然后形成酶標(biāo)記抗原-抗體免疫復(fù)合物,后用底物顯色。

酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳程序(檢測血吸蟲病)

1, 抗原血吸蟲卵蛋白質(zhì)純化

2, 酶標(biāo)記抗原(血吸蟲卵蛋白質(zhì))

3, 酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳

(1)器材與設(shè)備

(2)器材與試劑:酶標(biāo)蟲卵抗原溶液;健,病兔血清或健,病人血清;底物溶液:先配成飽和聯(lián)苯胺溶液,然后用等量0.01mol/L pH 7.6硼酸緩沖液稀釋,在臨用前加入H2O2,使H2O2終濃度為0.01%。

(3)實(shí)驗(yàn)程序:

按常規(guī)方法進(jìn)行對流免疫電泳與漂洗。

在底物與供氫體溶液中,室溫(20-25℃)反應(yīng)3h。

觀察和記錄。

  • 討論
  • 酶標(biāo)記蟲卵抗原保存時(shí)間以1個(gè)月內(nèi)為宜。
  • 制備了酶標(biāo)抗體,也可以用該法檢測相應(yīng)的抗原。

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