上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

固定處理后的抗原修復(fù)

時間:2011-7-27閱讀:1509
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1991年,S.RShi等人在H.Fraenkel-Conrat等人一系列生物化學(xué)研究的基礎(chǔ)上,發(fā)展出抗原修復(fù)(Antigen retrieval,簡稱AR)技術(shù)。在免疫酶組織化學(xué)技術(shù)中均需要對抗原進(jìn)行固定,但是因為固定的處理使抗原進(jìn)行固定抗原的活性大為降低,例如福爾馬林固定時,組織中的許多氨基酸殘基在分子內(nèi)或分子間形成了醛鍵,使得不少抗原決定簇被封閉。同時,由于甲醛的聚合作用,使蛋白質(zhì)分子間相互交聯(lián)形成大分子網(wǎng)絡(luò),從而導(dǎo)致抗原決定簇被掩蓋,這就使得相當(dāng)部分的抗原不能與抗體很好進(jìn)行反應(yīng)。抗原修復(fù)是改善免疫酶組織化學(xué)染色結(jié)果的重要措施。

將用于免疫酶組織化學(xué)(IHC)中的石蠟、冰凍、火棉膠和塑料切片用胰蛋白酶、尿素、表面活性劑、微波緩沖液和金屬鹽等處理,使被掩蓋的抗原決定簇或變性的抗原重新暴露,從而使抗原性得到一定程度的恢復(fù)??乖迯?fù)能zui大程度地恢復(fù)在制片等過程中損失的抗原性,使原來認(rèn)為不能在石蠟切片上進(jìn)行免疫酶組織化學(xué)的許多抗體獲得良好的染色結(jié)果,因此抗原修復(fù)成為一種有效的補救措施。

 

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