產(chǎn)品名稱：大鼠腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒

腫瘤浸潤(rùn)組織【檢驗(yàn)原理】

本分離液為 FICOLL、羥乙一基淀粉 550 與泛影酸葡甲胺的混合液?？鼓嚎稍诜蛛x液

中分層。離心時(shí)，在 FICOLL、羥乙一基淀粉的作用下紅細(xì)胞與粒細(xì)胞聚集并迅速沉降；此時(shí)，

白細(xì)胞仍處于分離液上層及分離液層，紅細(xì)胞污染可通過紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞去除。大

部分血小板可在細(xì)胞清洗低速離心過程中去除。

其他人及動(dòng)物多種比重細(xì)胞分離液，因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞

帶電不同，用戶在制定分離液時(shí)應(yīng)提供所需分離液的比重、動(dòng)物種屬及被分離細(xì)胞的名稱。

【*但不提供的儀器及耗材】

可提供 400g 離心力的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)、15ml 玻璃離心管、吸管等。

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腫瘤浸潤(rùn)組織【注意事項(xiàng)】

1. 使用前，本分離液需復(fù)溫至 18-22℃。為獲得*的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在取血后 2 小時(shí)內(nèi)

進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液提取后存放時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)胞活性越低。

2. 實(shí)驗(yàn)過程中，如需稀釋血液或洗滌細(xì)胞，不可使用含 Ca、Mg 離子的緩沖液及培養(yǎng)液，其

成分會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞凝集大大降低細(xì)胞得率及純度。本公司生產(chǎn)的全血及組織稀釋液和細(xì)胞洗

滌液不含 Ca、Mg 離子、低內(nèi)毒素水平且含細(xì)胞和保護(hù)成分，推薦使用。

3. *抗凝劑選擇：EDTA、枸櫞酸、肝素，其他抗凝劑也可使用，但會(huì)影響細(xì)胞活性。應(yīng)

注意在血液稀釋過程中去除抗凝劑體積。

4. 當(dāng)血液樣本粘度過高或血液樣本大于等于 3ml 時(shí)，*稀釋方法：將血液于 18-22℃以

250g 離心 10 分鐘，棄去血漿，補(bǔ)充添加全血及組織稀釋液（產(chǎn)品編號(hào)：2010C1119），添

加量為所棄去血漿體積的 1.5-2 倍，混勻備用。注：不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞?huì)降低細(xì)胞得率及活性。

5. 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，不可使用含粉手套、不可使用內(nèi)毒素含量過高的液體，手套中的粉末顆粒

及高內(nèi)毒素會(huì)激活細(xì)胞從而降低細(xì)胞得率及活性。

6. 本實(shí)驗(yàn)不可使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，其帶有的靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞

貼壁影響分離效果。

7. 吸取過多的白細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)

胞數(shù)量增加。

8. 吸取過多的白細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。

9. 如需進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，則需血液貯藏時(shí)間不得多于 10 小時(shí)，否則將導(dǎo)致細(xì)胞被激活，得率降低。

10. 為去除所混雜的血小板，可在分離液上層加上 4-20%蔗糖梯度等滲溶液進(jìn)行二次離心。

11. 細(xì)胞純度可在步驟 10 后使用瑞氏染色方法確定，細(xì)胞活性可用臺(tái)盼藍(lán)處理后觀察。