摘要
本文建立了仙茅中仙茅苷的HPLC測(cè)定方法。
參照2020版《中國(guó)藥典》仙茅含量測(cè)定的色譜條件,采用色譜柱ShimNex CS C18分析仙茅中仙茅苷。
結(jié)果顯示,仙茅苷峰型對(duì)稱,理論塔板數(shù)大于3000,仙茅苷與相鄰雜質(zhì)峰基線分離,滿足《中國(guó)藥典》要求。此方法可為仙茅中仙茅苷的檢測(cè)提供參考。
實(shí)驗(yàn)部分
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
Shimadzu LC-40D高效液相色譜儀;
色譜柱:ShimNex CS C18
(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01230-01;S/N:1FC07857);
純水機(jī):PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Disc HPPTFE針式過(guò)濾器(P/N:380-00341);
LC/MS認(rèn)證樣品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
Nichipet Air移液槍:
Nichipet Air 0.5-10 μL(P/N:00-NAR-10);
Nichipet Air 10-100 μL(P/N:00-NAR-100);
Nichipet Air 100-1000 μL(P/N:00-NAR-1000);
Nichipet Air 1000-10000 μL(P/N:00-NAR-10000)。
1.2 對(duì)照品溶液的制備
取仙茅苷對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1 mL含70 μg的溶液,即得。
1.3. 供試品溶液的制備
取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約1g,精密稱定,精密加入甲醇50 mL,稱定重量,加熱回流2小時(shí),取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液20 mL,蒸干,殘?jiān)蛹状既芙?,轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
1.4 分析條件
色譜柱:ShimNex CS C18
(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01230-01;S/N:1FC07857)
柱溫:25℃
檢測(cè)波長(zhǎng):285 nm
流速:1.0 mL/min
進(jìn)樣量:10 μL
流動(dòng)相:
A:0.1%磷酸水溶液
B:乙腈
A:B=79:21
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
按照上述色譜條件(1.4)進(jìn)行采集,對(duì)照品溶液和供試品溶液色譜圖如下:
對(duì)照品溶液
供試品溶液
結(jié)論
本文建立了仙茅中仙茅苷的HPLC測(cè)定方法。參照2020版《中國(guó)藥典》仙茅含量測(cè)定的色譜條件,采用色譜柱ShimNex CS C18分析仙茅中仙茅苷,結(jié)果顯示,仙茅苷峰型對(duì)稱,理論塔板數(shù)大于3000,仙茅苷與相鄰雜質(zhì)峰基線分離,滿足《中國(guó)藥典》要求。此方法可為仙茅中仙茅苷的檢測(cè)提供參考。
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