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大鼠ELISA試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)工具,它通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)來檢測(cè)和定量分析大鼠體內(nèi)特定蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。
在選擇大鼠ELISA試劑盒時(shí),需要考慮以下幾個(gè)關(guān)鍵因素:
1.蛋白濃度:通過NCBI、uniprot等數(shù)據(jù)庫(kù)查找待測(cè)樣本的蛋白表達(dá)量參考值,與試劑盒中給出的樣本值進(jìn)行比較。
2.應(yīng)用種屬與檢測(cè)樣本種類:確保試劑盒適用于大鼠樣本,并注意不同抗凝劑處理的血清和血漿、細(xì)胞上清及細(xì)胞裂解液等樣本類型的適用性。
3.檢測(cè)范圍與稀釋線性:選擇具有合適檢測(cè)范圍和良好稀釋線性的試劑盒,以確保待測(cè)樣本濃度落在標(biāo)曲范圍內(nèi)。
4.靈敏度與變異系數(shù):高靈敏度的試劑盒適用于低濃度樣本的檢測(cè);板間和板內(nèi)變異系數(shù)(CV%)應(yīng)小于10%。
5.有效期:考慮試劑盒的有效期,確保在有效期內(nèi)使用。
大鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。具體步驟如下:
1.包被:將特異性抗體(如大鼠白細(xì)胞介素1β捕獲抗體)預(yù)先包被在微孔板中。
2.加入樣本和標(biāo)準(zhǔn)品:依次加入待測(cè)樣本、標(biāo)準(zhǔn)品以及HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體。
3.溫育與洗滌:經(jīng)過一定時(shí)間的溫育后,洗滌以去除未結(jié)合的成分。
4.顯色反應(yīng):加入底物TMB(四甲基聯(lián)苯胺),TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中的特定蛋白質(zhì)含量呈正相關(guān)。
5.讀數(shù)與分析:用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。
研域(上海)化學(xué)試劑有限公司是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和銷售的綜合性生物科學(xué)公司,產(chǎn)品暢銷國(guó)內(nèi)大部分地區(qū),專注于高品質(zhì)大鼠ELISA試劑盒的整合和研發(fā),打造國(guó)內(nèi)好大鼠ELISA試劑盒,希望能為國(guó)家科研事業(yè)做出貢獻(xiàn),將以品質(zhì)和周到的服務(wù)竭誠(chéng)為您服務(wù)!
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