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研域(上海)化學試劑有限公司資料大小
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615次檢測范圍:
96T 3μg/L -120μg/L
使用目的:
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中脂聯(lián)素(ADP)含量。
小鼠脂聯(lián)素(ADP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠脂聯(lián)素( ADP) 。用純化的小鼠脂聯(lián)素 (ADP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入脂聯(lián)素(ADP),再 與 HRP 標記的脂聯(lián)素(ADP)抗體 ,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后 加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃 色。顏色的深淺和樣品中的脂聯(lián)素(ADP)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度 (OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠脂聯(lián)素(ADP)濃度。
試劑盒組成 標本要
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能 馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過 (HRP)活性。
小鼠脂聯(lián)素(ADP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、 待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl, 然后再加待測樣品 10μl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 溫育:用封板膜封板后 37℃溫育30分鐘。 30倍稀釋后備用 配液:將 30倍濃 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜 重復(fù) 5次,拍干。 30秒后棄去,如此 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。 溫育:操作同 3。 洗滌:操作同 5。 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 15分鐘. 10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn))。 11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止 液后 15分鐘以內(nèi)進行。
小鼠脂聯(lián)素(ADP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作程序總:
計算 以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上 ,根據(jù)樣品的 OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD值計算出標 準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù), 即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未 用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有 析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間 控制在 5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD值 大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計 算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉 6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗 8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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