實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點"，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間，更確保血清的質量!
細胞培養(yǎng)中出現黑點是污染嗎?如何處理?
一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現可能與以下幾種情況有關：
（1）細胞生長過老，破碎的細胞殘骸;
（2）血清質量不好，反復凍融的結果;
（3）配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長;
（4）配制培養(yǎng)基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;
（5）培養(yǎng)原代細胞中出現小黑點，可能是原代組織中的雜質，多次傳代可以消除。
9、 細胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?
（1） 盡可能地減少血清凍融次數。
（2） 培養(yǎng)基無需37℃水浴。
（3） 培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2。
（4） 嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質，容器定期刷洗。
（5） 掌握細胞傳代的*時機，細胞切勿生長過老。
10、小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?
來源不同：胎牛血清（Fetal Bovine Serum ,FBS） 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛（小牛）血清（Calf serum, CS）采自出生10至14 天的小牛。
組份與比例不同：兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細胞必需胎牛血清才能生長，而有些細胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。
血清保存和使用須注意：血清應保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ，應先將血清至于2-8℃冰箱，并經常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后，應按用量分裝并于-20℃保存，避免反復凍融。