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ELISA試劑盒試驗(yàn)中常會(huì)遇到這些疑問(wèn):
1. 溫育條件不一致,恒溫箱溫育較水浴顯色深,OD值高出0.1-0.15,均選用恒溫箱。如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。
2. 樣品數(shù)量不一,加樣時(shí)間長(zhǎng)短不一。當(dāng)重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與初次挨近。
考慮到有些客戶沒(méi)有試驗(yàn)設(shè)備,我公司還可以供應(yīng)代測(cè)效力,只需付試劑盒的費(fèi)用,代測(cè)是免費(fèi)的哦!
間接法 :此測(cè)定辦法與直接法相似,不一樣在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。
雙抗體夾心法 :被查看的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。
ELISA試劑盒另一個(gè)則是查看抗體,此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量;或不符號(hào),再透過(guò)酶符號(hào)的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。
這兩種抗體有必要留神選擇,才可防止交互反應(yīng)或比賽一樣的抗原聯(lián)絡(luò)部位。
比賽法:樣本里的抗原(清閑抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一起比賽一樣的抗體,當(dāng)樣品里的清閑抗原越多,就可以聯(lián)絡(luò)越多的抗體,而固定抗原就只能聯(lián)絡(luò)到較少的抗體,反之亦然。
經(jīng)清潔進(jìn)程,洗去清閑抗原和抗體的復(fù)合物,只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物,拿來(lái)與只需固定抗原的對(duì)照組作用相比較,依據(jù)呈色區(qū)別就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。
ELISA試劑盒直接法 :將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
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