食品細菌快速測定儀的操作原理及方法
食品細菌快速測定儀的操作原理和方法因儀器類型而異,以下是幾種常見類型的操作原理及方法:
一、操作原理
ATP生物發(fā)光法:
原理:ATP(三磷酸腺苷)是所有生物細胞中均有的能量分子,測定出樣品中細菌細胞的ATP含量,即可得知細菌數(shù)。該儀器利用生化作用使細菌細胞的ATP發(fā)光,以其光亮度測定細菌量,同時用生物方法分離非細菌細胞的ATP以避免假陽性,并用化學(xué)手段除去干擾物質(zhì)(如鹽、商業(yè)消毒劑等)的萃滅作用以避免假陰性。
過氧化物酶檢測法:
原理:細菌、真菌等好氧微生物在新陳代謝時產(chǎn)生一種過氧化物酶,儀器檢測的就是過氧化物酶。過氧化物酶的產(chǎn)生與生物活性的高低成一定比例,因此樣品中現(xiàn)存的酶的數(shù)量可以反映當(dāng)前總的生物活性。
二、操作方法
ATP生物發(fā)光法測定儀:
準(zhǔn)備階段:打開機器,點擊檢測,儀器提示“放入拭子”進入檢測界面。從冰箱中取出拭子,放置10-15分鐘,待恢復(fù)至室溫后使用。
采樣階段:從套管里取出拭子,一手捏住連接頭,擦拭物體表面(如45°傾斜,10×10cm表面)。將采集器插回套管。
處理階段:一手捏住連接頭,一手捏住囊體上部,來回彎折,直至折斷閥門。擠壓拭子頭3次(或輕甩5下拭子),使拭子頭中的液體全部被擠出。
檢測階段:立即將拭子插入儀器中檢測,點擊檢測按鈕,15秒后出檢測結(jié)果。
基于過氧化物酶檢測的儀器(如HMBX儀器):
液體樣品:取1支空的測試管,移去皮塞,向內(nèi)面加10滴50C試劑,然后用注射器取10ml的樣品加入試管中。加10滴50R試劑于試管中,用皮塞蓋好反應(yīng)管,用排風(fēng)裝置刺破皮塞排2-3次后移去,搖擺試管混合試劑,等15分鐘左右,再搖擺試管。打開儀器開關(guān)“ON”,3-4秒后顯示“00.00”,輕彈反應(yīng)管使管壁上的液體流下,插入反應(yīng)管,用探針開始測量,讀數(shù)BRM,使用“mode”讀出CFU。
固體樣品:取1g樣品加入到預(yù)先裝入試劑的試管中,后續(xù)步驟與液體樣品相同。