“八連排一打開就飛濺，樣本全灑了！”
“蓋子蓋不穩(wěn)，P出來時已揮發(fā)......"
想要 PCR 一次做成，避免 PCR 管帶來的「尷尬情況」？首先要學(xué)會 PCR 管的選用，一款「高清、穩(wěn)定、有數(shù)字、體積合適」的 PCR 管真的可以帶你逃離社死現(xiàn)場。本文整理 3 個 tube 選擇維度，帶你挑選適合的那個。
根據(jù)樣本數(shù)量，選擇 3 種 tube
01 少量樣本如何選管？
首先可以考慮實驗通量，根據(jù)樣品數(shù)量選擇耗材。少量樣品的實驗可以選擇 PCR 單管、八聯(lián)管或十二聯(lián)管，減少耗材的消耗。
>>>PCR 單管: 獨立管＋獨立蓋子的組合，相對于 PCR 聯(lián)管和 PCR 板更能確保樣品的獨立性，避免樣品之間發(fā)生交叉污染，適合在樣品量非常少的時候使用。
>>>PCR 聯(lián)管: 常見的 PCR 聯(lián)管有八聯(lián)管和十二聯(lián)管，在處理樣品數(shù)量稍多一些的實驗時，比 PCR 單管更具有操作的便捷性。出于避免樣品污染或者方便 PCR 產(chǎn)物回收的考慮，可以選擇每一個管子帶獨立蓋子的 PCR 聯(lián)管。
02 大量樣本可選「孔板」
如果樣品數(shù)量多，那么為了方便批量操作，可以根據(jù)樣品數(shù)量挑選 24 孔、48 孔、96 孔或 384 孔的 PCR 板。在挑選 PCR 板的時候，需要額外考慮 PCR 板的切角和裙邊設(shè)計。有了這兩個「助手」，加樣順序就能一目了然，避免眼花繚亂。
>>>切角：一般用 PCR 板的數(shù)字字母組合定位，PCR 板上 8 個行常用大寫英文字母表示，12 個列則用阿拉伯?dāng)?shù)字表示。故而切角位置在 A12 代表 96 孔 PCR 板的右上角位置有倒角設(shè)計。
>>>裙邊：是在 PCR 孔口所在平面的基礎(chǔ)上向上或向下延伸的垂直邊緣。沒有垂直邊緣就是無裙邊，垂直邊緣向上延伸稱為升裙邊，垂直邊緣向下延伸又可以分為兩種情況——邊緣向下延伸到底的稱為全裙邊，邊緣向下延伸但不到板底的稱為半裙邊。
根據(jù)反應(yīng)體系，選 tube 容量
其次，可以考慮反應(yīng)體系大小進行選擇。各類 PCR 耗材還有常規(guī)容量和低容量之分，對于樣品珍貴稀少，或者所需反應(yīng)體系較小的 PCR 實驗可以用低容量的 PCR 耗材來降低樣品和試劑的用量。
根據(jù)目的，選「凸蓋」或「聯(lián)蓋」
還可以從實驗?zāi)康某霭l(fā)考慮。普通 PCR 實驗選擇凸蓋的 PCR 管或聯(lián)蓋，更有利于保持 PCR 耗材在實驗過程中的形狀穩(wěn)定性，防止管口和孔口在經(jīng)歷劇烈溫度變化時因為形變而導(dǎo)致樣品蒸發(fā)。
qPCR 實驗則一定需要選擇平蓋的 PCR 管或聯(lián)蓋以確保熒光透過率，必要時也可以選擇用高透明度的封板膜進行批量密封。最后，白色孔的 PCR 耗材能夠在更短時間內(nèi)完成 qPCR 的熒光定量。
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PCR 實驗已經(jīng)是生物實驗室的基礎(chǔ)實驗之一，小伙伴們?nèi)諒?fù)一日配制的 PCR 體系充滿了枯燥又辛苦的重復(fù)勞動。
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