原來還可以用這種方法代替動物實驗?。?/h2>

閱讀：316      發(fā)布時間：2024-8-2

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重組人體表皮（RhE）可以部分替代動物實驗、甚至可能比動物實驗更能作為人體情況預(yù)測參考的系統(tǒng)，因此在刺激性和腐蝕性化學(xué)品的危害識別和監(jiān)管領(lǐng)域（如OECD TG 431試驗）具有重要的價值。制藥和化妝品等領(lǐng)域也始終在嘗試借助人造人體組織開展耐受性、毒理學(xué)和刺激性研究，從而盡可能地減少開展動物實驗。

 

用于監(jiān)管決策的RhE必須經(jīng)過驗證滿足一定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，才能夠可靠地區(qū)分化學(xué)品的潛在危害性。研究人員用BRAND Insert 2in1嵌套培養(yǎng)小室體系，采用先浸沒培養(yǎng)、后氣液相（ALI）培養(yǎng)的方式構(gòu)建出了RhE，并對其形態(tài)、屏障功能和化學(xué)品體外腐蝕進行了檢測。

結(jié)果顯示，用BRAND Insert 2in1嵌套培養(yǎng)小室建立的RhE模型在形態(tài)學(xué)、屏蔽功能檢測和體外腐蝕性測試實驗的檢測結(jié)果與其他品牌小室內(nèi)建立的沒有顯著差異，并且在體外腐蝕性測試實驗結(jié)果統(tǒng)計中表現(xiàn)出更小的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

 

01

形態(tài)學(xué)檢測

對RhE模型的橫截面進行HE染色，可以看到清晰的組織結(jié)構(gòu)。

圖1. 對在BRAND Insert 2in1嵌套培養(yǎng)小室（左）與某品牌小室（右）中培養(yǎng)的RhE模型進行HE染色，人源性角質(zhì)形成細胞發(fā)育成了具有多層角質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

 

 

02

屏障功能檢測（EC50）

在570nm波長下檢測出給定的時間里暴露于化學(xué)品的培養(yǎng)物平均存活率大于50%，顯示RhE模型具有明顯的屏障功能。

圖2. 用MTT法檢測暴露于PBS和Triton X-100的RhE模型活性。

 

 

03

體外腐蝕性測試實驗

陰性對照測試比對結(jié)果顯示，在BRAND Insert 2in1嵌套培養(yǎng)小室與某品牌小室中培養(yǎng)的RhE模型存活率相近，并且由BRAND Insert 2in1嵌套培養(yǎng)小室建立的RhE模型存活率結(jié)果的數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)偏差更小。

表1. MTT法檢測暴露于PBS的RhE模型活性

為了測試RhE模型是否可用于鑒別化學(xué)物質(zhì)的潛在腐蝕性，將建立的RhE模型暴露在一組化學(xué)物質(zhì)中3分鐘或60分鐘后，對其進行MTT檢測，并將檢測結(jié)果進行歸一化處理。結(jié)果顯示，暴露后，RhE模型在非腐蝕性物質(zhì)，如4-（甲硫基）-苯甲醛中可以保持大于50%的活性，而在預(yù)評估為腐蝕性物質(zhì)的甲酸、乳酸中以及陽性對照組實驗中的活性顯著降低。

圖3. 不同化學(xué)物質(zhì)的腐蝕性比較（NC，陰性對照。PC，陽性對照）

 

 

綜上所述，BRAND Insert 2in1嵌套培養(yǎng)小室建立的RhE模型，具有良好的形態(tài)，清晰的組織結(jié)構(gòu)，完整的屏障功能，可用于體外化學(xué)腐蝕性分析，并能帶來更穩(wěn)定的檢測數(shù)據(jù)。

 

 

Insert 2 in 1 細胞培養(yǎng)小室 亮點一覽

01

支持懸掛 & 站立2種模式，兼容市面上大部分ANSI/SLAS規(guī)格的多孔培養(yǎng)板。通過掛鉤或底角三點固定，站立模式下透過膜與底面保持平行且留有1 mm距離，提供充足的細胞生長空間。

02

獨特的偏心設(shè)計讓加液、換液一步到位，無需移動小室，減少對細胞不必要的干擾，降低污染風(fēng)險。

03

升級的Cellgrade Plus表面處理，除了必要的羧基和羰基外，膜表面還含有類蛋白成分，適用于減血清培養(yǎng)，讓培養(yǎng)條件苛刻的細胞更快貼壁、高效增殖。

 

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