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技術(shù)文章

羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒?產(chǎn)品特點

點擊次數(shù):755 發(fā)布時間:2022-3-17

羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒產(chǎn)品特點:

1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;

2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;

3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。

在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

 特異性熒光標記:

 TaqMan法

 TaqMan探針的特性:

(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等

(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)

(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光

(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針

相對定量通過內(nèi)標定量:

內(nèi)標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。

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RSC, 大鼠雪旺細胞

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細胞

RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞

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rCF, 大鼠心臟成纖維細胞

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元

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小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)

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