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胚胎成纖維細胞,沙眼衣原體PCR檢測試劑盒

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植酸酶測試盒

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【詳細說明】

商品詳情:
植酸酶測試盒測定意義

植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對環(huán)境的污染,改善營養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價值。

貨號

規(guī)格

檢測方法

YSH3533

100管/48樣

微量法

YSH3533-1

50管/24樣

可見分光光度法

測定原理

植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機磷與肌醇衍生物,無機磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋,超聲溶解器,回旋式振蕩器。
樣品中AA提取:

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。

2.細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3.血清等液體:直接檢測。

計算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細菌或細胞總數(shù),2000萬。

注意事項:

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個樣做預(yù)實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。

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血管活性肽酶抑制劑檢測試劑盒 VPI ELISA Kit

旋毛蟲抗體檢測試劑盒 Trichinella Ab ELISA Kit

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五肽檢測試劑盒 TP-5 ELISA Kit

檢測試劑盒 Thymosin ELISA Kit

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50管/48樣脫氫酶(SH)測試盒/分光光度法

100管/96樣脫氫酶(SH)測試盒/微量法

50T/48樣脫氫酶測試盒/比色法

50管/48樣生物堿含量測試盒/分光光度法

100管/96樣生物堿含量測試盒/微量法

50管/48樣食品中亞硝鹽含量測試盒/分光光度法

100T/96S食品中亞硝鹽含量測試盒/微量法

50T/48S雙縮脲法蛋白含量測試盒/分光光度法


    
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