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上海旦鼎國際貿(mào)易有限公司

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產(chǎn)品分類品牌分類

艾本德: 艾本德離心機(jī)

pcr儀基因擴(kuò)增儀: 伯樂PCR儀美國ABI快速PCR儀 ABI 賽默飛PCR儀美國伯樂pcr儀基因擴(kuò)增儀

分子生物: 電源電泳儀小型電泳轉(zhuǎn)印槽電穿孔儀蛋白轉(zhuǎn)印系統(tǒng) 超微量分光光度計熒光計默克細(xì)胞電阻儀細(xì)胞計數(shù)儀酶標(biāo)儀蛋白轉(zhuǎn)印儀洗板機(jī) 混勻儀核酸蛋白提取儀|核酸提取儀分子雜交儀|雜交爐菌落計數(shù)器

電泳設(shè)備: 電泳儀電源電泳儀電泳槽

IKA RCT Basic磁力攪拌器

顯微鏡|凝膠成像: 金相顯微鏡顯微鏡|生物顯微鏡|熒光顯微鏡|倒置顯微鏡凝膠成像系統(tǒng)

培養(yǎng)箱|搖床: 多功能培養(yǎng)箱振蕩器二氧化碳培養(yǎng)箱|CO2培養(yǎng)箱霉菌培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱低溫培養(yǎng)箱植物培養(yǎng)箱恒溫恒濕箱|恒溫恒濕試驗(yàn)箱振蕩保存箱德國ika振蕩搖床恒溫?fù)u床恒溫培養(yǎng)箱隔水式培養(yǎng)箱

制冷設(shè)備|恒溫設(shè)備: 金屬浴恒溫金屬浴配件水浴箱環(huán)境保存箱血液保存箱藥品保存箱液氮罐冷凍干燥機(jī) 低溫恒溫槽|冷卻循環(huán)器制冰機(jī)|雪花制冰機(jī) 低溫冰箱|低溫保存箱

光學(xué)儀器: 顯微鏡色差儀折射儀|旋光儀原子熒光分光光度計旋光儀比色計|色度測定儀光澤度儀|光澤儀紫外可見分光光度計白度儀

食品檢測|農(nóng)產(chǎn)品檢測儀: 農(nóng)產(chǎn)品水分儀多功能食品安全分析儀食品安全綜合檢測儀纖維測定儀凱式定氮儀 *測定儀|*儀三聚氰胺快速檢測儀|三聚氰胺測定儀食品添加劑檢測儀農(nóng)藥殘留檢測儀瘦肉精檢測儀乳品分析儀|牛奶分析儀牛奶冰點(diǎn)測定儀

科晶: 培養(yǎng)板培養(yǎng)皿加樣槽 8聯(lián)排實(shí)時熒光定量PCR管細(xì)胞培養(yǎng)板|瓶一次性乳膠手套|一次性丁腈手套血清移液器離心管冷凍盒凍存管加長吸嘴移液器吸嘴

通用分析儀器: 樣品處理儀器

細(xì)胞分析: 超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)

物理屬性: 熔點(diǎn)儀濁度儀|濁度計水分測定儀粘度計|旋轉(zhuǎn)粘度計

滅菌器|生物安全: 超聲波清洗機(jī)|超聲波清洗器高壓滅菌器干熱滅菌器生物安全柜凈化工作臺

電化學(xué)|水質(zhì)測定儀: 濁度計滴定儀 COD測定儀電導(dǎo)率儀溶解氧分析儀水質(zhì)分析儀|水質(zhì)檢測儀 PH計|酸度計哈希耗材|配件哈希試劑

環(huán)衛(wèi)園林: 塵埃粒子計數(shù)器 *炮竹探測儀|*探測儀煙氣分析儀|煙氣檢測儀甲醛檢測儀|甲醛測定儀水質(zhì)采樣器大氣采樣器空氣質(zhì)量檢測儀核輻射檢測儀

土壤分析: 土壤溫濕度記錄儀|溫濕度檢測儀土壤儀器設(shè)備土壤水分測定儀土壤養(yǎng)分測定儀

藥物測定: 紫外分析儀|紫外可見光分析儀核酸蛋白檢測儀|智能核酸蛋白測定儀

無損檢測儀器: 超聲波測厚儀|數(shù)字超聲波測厚儀超聲波探傷儀管道檢測儀|埋地管道檢測儀

天平|衡量|力學(xué): 電子天平

真空泵|循環(huán)泵|蠕動泵: 皮帶式真空泵無油真空泵旋片真空泵|隔膜真空泵

樣品處理|離心|混合: 離心機(jī)|實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)|冷凍離心機(jī) 組織研磨機(jī)|樣品分散機(jī) 分散機(jī) 氮吹儀實(shí)驗(yàn)室氮吹儀乳化機(jī) 無菌均質(zhì)器|勻漿機(jī) 攪拌器漩渦混合儀|旋渦混勻儀切片機(jī) 多道移液器移液器電動多道移液器旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀

過濾器|純水器: 溶劑過濾器超純水機(jī)|超純水器

干燥箱|試驗(yàn)箱|加熱設(shè)備: 老化試驗(yàn)箱馬弗爐|電阻爐真空干燥箱鼓風(fēng)干燥箱

光度計: 紫外分光光度計

便攜式濁度儀: 濁度儀

消解儀: COD消解儀

甲醛測定儀: 空氣甲醛測定儀

農(nóng)藥殘毒檢測儀: 農(nóng)藥殘毒快速檢測儀

溶氧儀

實(shí)驗(yàn)室設(shè)備: 轉(zhuǎn)子搖床破碎儀離心機(jī)轉(zhuǎn)子混勻振蕩器超聲波細(xì)胞破碎儀磁力攪拌器單道移液器超聲波粉碎機(jī) 真空泵系統(tǒng) 培養(yǎng)箱混勻器三維混合儀器水平電泳槽電泳電源干式加熱器振蕩頭滅菌器軌道式搖床孵育器純水機(jī) 離心機(jī)

環(huán)境監(jiān)測設(shè)備: 輻射儀

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PCR反應(yīng)技術(shù)的反應(yīng)基本步驟

時間：2023/4/16閱讀：859

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1、變性

90～94℃的高溫處理可使模板 DNA 雙鏈間氫鍵斷裂,解離成單鏈但不改變其化學(xué)性質(zhì),變性的時間一般為30s,如果模板的 G+C 含量較高,變性時間可能延長。

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2、退火

退火的溫度一般降低至25～65℃。在退火過程中,引物分別與待擴(kuò)增的 DNA 片段的兩條鏈的3'端互補(bǔ)配對。退火的溫度取決于引物的 T_m值,并通過預(yù)備試驗(yàn)來最后確定。一般引物越短,其 T_m也越低,對于10bp 左右的隨機(jī)引物,退火溫度在37℃左右,反之則高。退火溫度越高,引物與模板結(jié)合的特異性增強(qiáng),非特異性的擴(kuò)增概率降低,但擴(kuò)增效率也隨之降低。相反,隨著溫度的降低,引物與模板非特異性結(jié)合的概率提高。引物的長度越長,其退火溫度則越高,否則會發(fā)生非特異性結(jié)合,降低 PCR 產(chǎn)物對模板的忠實(shí)程度。退火時間一般為30s。

3、延伸

Taq DNA 聚合酶的最適溫度為70～74℃,在此溫度下 Taq DNA 聚合酶以單鏈 DNA 鏈為模板,將單核苷酸逐個加入到引物的3'端,使引物不斷延長,從而合成新的 DNA 鏈。新合成的引物延伸鏈在下一輪循環(huán)時就可以作為模板。反應(yīng)步驟的溫度和時間可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求自行設(shè)定,一般要經(jīng)過20～30個循環(huán),擴(kuò)增產(chǎn)物需要經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行鑒定。

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