上海旦鼎國際貿(mào)易有限公司
中級會員 | 第15年

13564833058

艾本德
pcr儀 基因擴(kuò)增儀
分子生物
電泳設(shè)備
IKA RCT Basic磁力攪拌器
顯微鏡|凝膠成像
培養(yǎng)箱|搖床
制冷設(shè)備|恒溫設(shè)備
光學(xué)儀器
食品檢測|農(nóng)產(chǎn)品檢測儀
科晶
通用分析儀器
細(xì)胞分析
物理屬性
滅菌器|生物安全
電化學(xué)|水質(zhì)測定儀
環(huán)衛(wèi)園林
土壤分析
藥物測定
無損檢測儀器
天平|衡量|力學(xué)
真空泵|循環(huán)泵|蠕動泵
樣品處理|離心|混合
過濾器|純水器
干燥箱|試驗(yàn)箱|加熱設(shè)備
光度計(jì)
便攜式濁度儀
消解儀
甲醛測定儀
農(nóng)藥殘毒檢測儀
溶氧儀
實(shí)驗(yàn)室設(shè)備
環(huán)境監(jiān)測設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室凝膠電泳操作注意事項(xiàng)

時(shí)間:2023/9/17閱讀:1165
分享:
1.選用優(yōu)質(zhì)的瓊脂糖:不同品牌的瓊脂糖在質(zhì)量上有較大的差異。劣質(zhì)瓊脂糖會導(dǎo)致DNA條帶模糊,甚至條帶缺失。因此請盡量選擇質(zhì)量穩(wěn)定可靠的品牌。

2.選擇適當(dāng)?shù)哪z濃度:
瓊脂糖凝膠的線性DNA分辨范圍

 3.凝膠制備:配制凝膠和電泳應(yīng)選用相同的1x緩沖液;使用的容器體積至少是凝膠溶液的3倍,以免溶液沸騰時(shí)溢出;制膠過程中盡量趕除氣泡;根據(jù)樣品的濃度和體積選擇適當(dāng)大小的梳子。

4.選擇適當(dāng)?shù)碾娪揪彌_液:GenStar® SD緩沖液(Cat. No. E101-50)和TBE緩沖液適用于分離比較小的DNA片段,TAE緩沖液(Cat. No. E102-50)適用于分離比較大的DNA片段;緩沖液應(yīng)及時(shí)更新;膠回收純化應(yīng)使用新鮮配制的1x電泳緩沖液,以防核酸酶和DNA雜帶污染。

5.核酸樣品的準(zhǔn)備:提取的DNA樣品應(yīng)去除蛋白和多余的鹽分等雜質(zhì);PCR樣品應(yīng)盡量在24小時(shí)內(nèi)電泳檢測,否則條帶容易模糊。

6.上樣緩沖液:所有泳道應(yīng)使用相同的上樣緩沖液,以防止因離子強(qiáng)度不同造成條帶遷移率偏差。

7.適量上樣:上樣過多會導(dǎo)致上樣孔超載,出現(xiàn)拖帶現(xiàn)象;上樣體積過小可能導(dǎo)致條帶亮度不均。

8.電壓及電泳時(shí)間:根據(jù)電泳槽型號、凝膠濃度、電泳緩沖液種類和目的條帶大小等選擇適當(dāng)?shù)碾妷汉碗娪緯r(shí)間。使用GenStar®SD電泳緩沖液時(shí),電壓設(shè)置為20~35 v/cm膠長;使用TAE或TBE緩沖液時(shí),最大電壓以不超過20 v/cm膠長為宜。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言