酶標(biāo)儀的分類以及特性功能

前言：我們大家都知道生物實(shí)驗(yàn)中有個(gè)重要的實(shí)驗(yàn)就是酶特性的實(shí)驗(yàn)，那么在做實(shí)驗(yàn)時(shí)有一個(gè)用來對酶進(jìn)行做標(biāo)記的儀器就是酶標(biāo)儀，我們并不是特別的了解酶標(biāo)儀，知識知道它的作用而已。下面就由小編為大家做一下酶標(biāo)儀的簡單介紹，希望對大家了解酶標(biāo)儀有所幫助。

酶標(biāo)儀介紹：主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、探測器和微處理器控制系統(tǒng)等組成

酶標(biāo)儀原理：實(shí)際上就是一臺變相的光電比色計(jì)或分光光度計(jì)，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同. 如圖是一種單通道自動(dòng)進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖.

光源燈發(fā)出的光線經(jīng)過濾光片或單色器后，成為一束單色光。該單色光束經(jīng)過酶標(biāo)板中的待測標(biāo)本，被標(biāo)本吸收掉一部分后，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號。光電檢測器將投照到上面的光信號的強(qiáng)弱轉(zhuǎn)變成電信號的大小。此電信號經(jīng)前置放大、對數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等處理后，送人微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算，較為后通過顯示器和打印機(jī)輸出測試結(jié)果。

酶標(biāo)儀的分類：

按照濾光方式的不同可分為：濾光片式的酶標(biāo)儀和光柵式酶標(biāo)儀

按照功能可以分為：光吸收酶標(biāo)儀,熒光酶標(biāo)儀,化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀和多功能的酶標(biāo)儀

濾光片式的酶標(biāo)儀：采用濾光片來進(jìn)行波長的選擇,酶標(biāo)儀內(nèi)置濾光片輪,可選擇試驗(yàn)所需的不同波長的濾光片來進(jìn)行分光,光源發(fā)出的全波譜光經(jīng)過濾光片后,大部分被過濾,只剩下濾光片本身允許的波長通過,這樣就可就通過濾光片來獲得特定的波長

光柵式酶標(biāo)儀：采用光柵進(jìn)行分光,光源發(fā)出的全波譜光線經(jīng)過光柵后,通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光,就可以獲得任意波長的光，波長連續(xù)可調(diào)，一般遞增量為1nm.

光吸收酶標(biāo)儀：用來進(jìn)行可見光與紫外光吸光度的檢測.特定波長的光通過微孔板中的樣品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關(guān)系,由此可以用來定性和定量的檢測。

熒光酶標(biāo)儀：用來進(jìn)行熒光的檢測.通過激發(fā)光柵分光后的特定波長的光照射到被熒光物質(zhì)標(biāo)定的樣品上后,會發(fā)出波長更長的發(fā)射光,通過發(fā)射光柵后到達(dá)檢測器.熒光的強(qiáng)度與樣品的濃度呈一定的比例

化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀：來自生物化學(xué)反應(yīng)中的自發(fā)光,可分為輝光型和閃光型兩種類型.輝光型發(fā)光持久,穩(wěn)定,能持續(xù)一段時(shí)間;閃光型發(fā)光時(shí)間短,變化快,穩(wěn)定性不強(qiáng),需要應(yīng)用自動(dòng)加樣器才可以進(jìn)行

多功能的酶標(biāo)儀：可以同時(shí)進(jìn)行光吸收,熒光和化學(xué)發(fā)光的檢測

優(yōu)缺點(diǎn)：

酶標(biāo)儀安裝環(huán)境要求：

儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓的位置。

儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下。

為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射。

操作時(shí)環(huán)境溫度應(yīng)在15℃－40℃之間，環(huán)境濕度在15%－85%之間。

操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。

操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽，煙塵。

保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。

酶標(biāo)儀的檢測流程：

使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，較為后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。

酶標(biāo)儀的八大特性功能：

一、測定波長。目前國內(nèi)常見的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根過氧化物酶（HRP），底物通常為四甲基聯(lián)苯胺（TMB）和鄰苯二胺（OPD）。

二、測定的吸光度范圍。通常，酶標(biāo)儀的吸光度測定范圍在。0-2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標(biāo)儀可測定的吸光度一般在0-2.5之間，但現(xiàn)在基本上都做了拓寬，可達(dá)到3.5以上，并且能保持很好的精密度與線性。

三、光學(xué)系統(tǒng)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道（通常為8或12通道，亦有單通道）檢測，一般為硅光管或光導(dǎo)纖維，除測定通道外，有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道，每次測定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何，均可通過酶標(biāo)儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來。

四、檢測速度。酶標(biāo)儀的檢測速度是指其完成比色測定所需要的時(shí)間。檢測速度快，有利于提高檢測的精密度，即避免由于測定過程中，因測定時(shí)間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。目前市場上常見的酶標(biāo)儀檢測速度都非?？?，通常在數(shù)秒鐘內(nèi)。

五、震板功能。酶標(biāo)儀的震板功能是指酶標(biāo)儀在對ELISA板孔進(jìn)行比色測定前對其進(jìn)行振蕩混勻，使板孔內(nèi)顏色均一。目前市場上常見的酶標(biāo)儀均有震板功能，所不同的是震板方式，有的可按上下、左右或旋轉(zhuǎn)等方式及振蕩幅度等任意調(diào)節(jié)。

六、溫育功能。溫育功能是指酶標(biāo)儀本身能按要求自動(dòng)地控制儀器內(nèi)部的溫度，使得ELISA測定中微孔板條的溫育過程可在儀器內(nèi)部完成，而無需再外配溫箱。目前，只有少部分酶標(biāo)儀具有此種功能

七、軟件功能。軟件功能是指酶標(biāo)儀所具有的對ELISA定性和定量測定及其他測定方式如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、紫外和凝集等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能。軟件功能是中酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。如果硬件方面區(qū)別不大，則軟件就成為判定酶標(biāo)儀優(yōu)劣的惟一指標(biāo)。對于用戶來說，好的軟件功能，對實(shí)際工作會有較大的幫助。

八、語言界面。通常進(jìn)口的中酶標(biāo)儀人機(jī)對話多采用英文。這對于某些基層實(shí)驗(yàn)室可能會存在語言方面的困難，從而難以較為大限度地發(fā)揮酶標(biāo)儀的作用。為解決這方面的問題，已有一些酶標(biāo)儀采用了中文界面

酶標(biāo)儀使用時(shí)注意事項(xiàng)：

在測量過程中，請勿碰酶標(biāo)板，以免酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手

請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成后請洗手。

儀器如果接觸過污染性或傳染性物品，請進(jìn)行清洗和消毒

洗板要洗干凈。盡量使用洗板機(jī)洗板，避免交叉污染。

嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。

使用加液器進(jìn)行加液，加液頭不能混用。

不要在測量過程中關(guān)閉電源。

對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差，可以根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù)，以達(dá)到較為佳效果。

使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害，請嚴(yán)格按照試劑盒的操作說明，以防對操作人員造成損害。

使用后蓋好防塵罩。

出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家，切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。

常見故障：

1、打印機(jī)不工作

酶標(biāo)儀后部DIL開關(guān)設(shè)置不正確。

酶標(biāo)儀內(nèi)置打印機(jī)開關(guān)處于開的位置。在總參數(shù)中設(shè)置內(nèi)置打印機(jī)為關(guān)。

打印機(jī)無紙或紙未裝好，請裝好打印紙。

打印機(jī)未聯(lián)機(jī)，請確認(rèn)打印機(jī)上的聯(lián)機(jī)鍵已聯(lián)機(jī)

打印機(jī)接口接錯(cuò)（接在了計(jì)算機(jī)接口上了）。應(yīng)將打印機(jī)接在DIL開關(guān)正下方的打印機(jī)接口上，RS-232接口為計(jì)算機(jī)接口。

打印機(jī)聯(lián)線有問題：有些配備的新打印機(jī)聯(lián)線仍有問題，請確保打印機(jī)聯(lián)線無問題。

打印機(jī)有開機(jī)順序，需先開打印機(jī)，后開儀器；有的需先開儀器，后開打印機(jī)。

2、調(diào)不出所編輯程序

如在臨界值模塊下編輯儲存的程序必須要在臨界值模塊下調(diào)出。

空白或陰性位置不正確。

肉眼結(jié)果與酶標(biāo)儀測定結(jié)果差異較大。

濾光片設(shè)置不正確：請?jiān)?ldquo;參數(shù)”中按濾光片輪中實(shí)際的情況設(shè)置濾光片。 

酶標(biāo)儀的應(yīng)用范圍：不僅應(yīng)用在醫(yī)療行業(yè)，用于酶聯(lián)免疫學(xué)的檢測工作，而且在食品衛(wèi)生，農(nóng)業(yè)，畜牧等產(chǎn)業(yè)以及各高等院校實(shí)驗(yàn)室中都有廣泛的應(yīng)用。

在醫(yī)學(xué)上采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行血液學(xué)，免疫學(xué)，腫瘤免疫學(xué)，傳染病免疫學(xué)，優(yōu)生優(yōu)育的血清學(xué)及基因?qū)嶒?yàn)。檢測項(xiàng)目主要包含以下幾項(xiàng)：

1，傳染病類：例如肝炎，艾滋病，衣原體，肺炎支原體，梅毒，水痘等

2，甲狀腺：促甲狀腺激素，T3T4等

3，不孕癥：性激素六項(xiàng)，泌乳素，雌三醇，生長素，抗精子抗體等

4，優(yōu)生優(yōu)育：弓形蟲抗體，巨細(xì)胞病毒，風(fēng)疹病毒等

5，腫瘤標(biāo)志物：癌胚抗原，甲胎蛋白，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，胃腸癌等

6，糖尿病：C肽，胰島素，胰島素抗體，胰島素原等

7，過敏原，皮膚不耐受等

在食品以及農(nóng)畜業(yè)的檢測項(xiàng)目包括：營養(yǎng)成分，添加劑，農(nóng)藥殘留量，菌毒素，無機(jī)毒素，抗生素激素殘留，致癌物質(zhì)殘留，有毒有害物質(zhì)污染等。

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