農(nóng)藥速測卡法測定農(nóng)藥殘留

農(nóng)藥速測卡是用對農(nóng)藥高度敏感的膽堿酯酶和顯色劑做成的酶試紙，可以快速檢測蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯這兩大類用量較大、毒性較高的殺蟲劑的殘留情況，選用的酶對甲胺磷敏感，抗干擾性強(qiáng)，操作簡便，不需要配制試劑，不需要專業(yè)的技術(shù)培訓(xùn)，可以不需要任何儀器設(shè)備單獨(dú)使用，產(chǎn)品容易貯存，攜帶方便，是現(xiàn)場檢測的較為佳方法。下面是上海旦鼎貿(mào)易有限公司整理的農(nóng)藥速測卡測定農(nóng)藥殘留的原理、操作步驟等。

農(nóng)藥速測卡參照MINI-MK （卡片式）農(nóng)殘速測卡

原理：膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯（紅色）水解為乙酸與靛酚（藍(lán)色），有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對膽堿酯酶有抑制作用，使催化、水解、變色的過程發(fā)生改變，由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。 

試劑：

固化有膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑的紙片（速測卡）。 

pH7.5緩沖溶液：分別取15.0g磷酸氫二鈉 [Na2HPO4·12H2O]與1.59g無水磷酸二氫鉀[KH2 PO4 ]，用500mL蒸餾水溶解。 

儀器：

常量天平 

有條件時(shí)配備37℃±2℃恒溫裝置。

操作步驟：

1、整體測定法 

（1）選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取5g放入帶蓋瓶中，加入10mL緩沖溶液，振搖50次，靜置2min以上。 

（2） 取一片速測卡，用白色藥片沾取提取液，放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤。 

（3）將速測卡對折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。 

（4）每批測定應(yīng)設(shè)一個(gè)緩沖液的空白對照卡。 

2、 表面測定法（粗篩法） 

（1）擦去蔬菜表面泥土，滴2滴~3滴緩沖溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。 

（2）取一片速測卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。 

（3）放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤。 

（4）將速測卡對折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。 

（5）每批測定應(yīng)設(shè)一個(gè)緩沖液的空白對照卡。 

結(jié)果判斷：

結(jié)果以酶被有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制（為陽性）、未抑制（為陰性）表示。

與空白對照卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對照卡相同，為陰性結(jié)果。

對陽性結(jié)果的樣品，可用其它分析方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。 

注意事項(xiàng)：

1、蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時(shí)，可采取整株（體）蔬菜浸提或采用表面測定法。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾。 

2、當(dāng)溫度條件低于37℃，酶反應(yīng)的速度隨之放慢，藥片加液后放置反應(yīng)的時(shí)間應(yīng)相對延長，延長時(shí)間的確定，應(yīng)以空白對照卡用手指（體溫）捏3min時(shí)可以變藍(lán)，即可往下操作。注意樣品放置的時(shí)間應(yīng)與空白對照卡放置的時(shí)間一致才有可比性。空白對照卡不變色的原因：一是藥片表面緩沖溶液加的少、預(yù)反應(yīng)后的藥片表面不夠濕潤，二是溫度太低。 

3、紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)的時(shí)間以3min為準(zhǔn)，3min后的藍(lán)色會逐漸加深，24h后顏色會逐漸退去。