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Northern Blotting實(shí)驗(yàn)

2011-10-26  閱讀(4870)

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有什么是定量PCR不能告訴你,而Northern Blot能告訴你的?-轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的長度和產(chǎn)物是否是單純。
Northern Blotting一直以來研究基因表達(dá)的常用方法,用來檢查轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是否單純。Ambion提供的Northern Blotting試劑消除了Blotting試驗(yàn)中大多數(shù)常見的煩惱:低轉(zhuǎn)膜效率,低信號(hào)值,高背景等,這些都已成為過去的記憶。
歸功于標(biāo)記技術(shù)的進(jìn)展,現(xiàn)在放射標(biāo)記法 已經(jīng)不再是Northern實(shí)驗(yàn)的*選擇。請參考選用invitrogen的非放射標(biāo)記試劑盒產(chǎn)品,以及傳統(tǒng)方法標(biāo)記產(chǎn)品。
技巧 提示
標(biāo)記探針合成實(shí)驗(yàn)在探針產(chǎn)物的率和放射標(biāo)記率之間平衡:越多放射標(biāo)記核苷酸比例,合成產(chǎn)物的率就會(huì)越低。如果你需要幫助估計(jì)合成探針的特異性活性,Ambiion可以幫助你:
用于RNA探針
http://www.ambion.com/techlib/tips/specific_activity_calculator.html
用于DNA探針
http://www.ambion.com/techlib/tips/DNA_specific_activity_calculator.html
4小時(shí)內(nèi)完成核酸轉(zhuǎn)膜
NorthernMax Kit
NorthernMax Kit包括電泳緩沖液,洗滌緩沖液,轉(zhuǎn)膜緩沖液,ULTRAhyb Ultrasensitive雜交緩沖液,即可用DNA探針有可用于RNA探針對照模板,對照RNA,RNaseZap和其他組分。
另有含乙二醛的的試劑盒版本,以用于不想使用甲醛的客戶。
AM1940 NorthernMax kit               1000CM2
其他Northern需要的組分
探針合成、分子標(biāo)記和轉(zhuǎn)印膜
 
 
 

轉(zhuǎn)印膜
 
 
 
AM10100
BrightStar-Plus Positively Charged Nylon Membrane  
5片膜
放射性標(biāo)記探針合成試劑
 
 
AM1312
MAXlscript T7 Kit+ for labeling RNA probes
30反應(yīng)
AM1455
DECAprimeTMII Kit for labeling DNA probes
30反應(yīng)
AM10070
NucAway Spin Columns removes unincorporated nucleotides
30反應(yīng)
非放射法標(biāo)記探針合成試劑盒
 
 
AM1480
BrightStar Bsoralen-Biotion Nonisotopic Labeling Kit for non-isotopic labeling with longwave UV
20反應(yīng)
AM12750
Protable UV Light for use with AM1480
1套
AM1930
BrightStar BioDetect Kit for nin-isotopic detection
1000cm2 of膜面積

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