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問題一:在過氧化物標記的雙夾心elisa實驗中得到的背景值較高,原因是什么?LowCross-Buffer®能起到什么作用嗎?答復:了解二抗能否與其他哺乳動物的抗體結合是非常重要的。除非是高度純化的抗體,抗兔lgG的二抗也能夠與鼠lgG,山羊lgG結合,原因是哺乳動物抗體的高度同源性,不經過純化(預吸附)的二抗可以與其他抗體進行高親和性的交叉反應,這種情況下,LowCross-Buffer起不到作用,二抗必須不能與捕獲抗體結合,例如,Biotrend可以提供各類避免此類交叉反應的預吸附抗體。問題
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Der p 1 ELISA 試劑盒 EL-DP1和EL-DP1A的區(qū)別
Derp1ELISA試劑盒EL-DP1和EL-DP1A的區(qū)別是什么?AINDOOR推出的兩個檢測Derp1的ELISA試劑盒,實驗中與之結合的單抗是不同的。EL-DP1:捕獲單抗為5H8,生物素標記的單抗為4C1EL-DP1A:捕獲單抗為10B9,生物素標記的單抗為5H8zui廣泛使用的ELISA試劑盒為EL-DP1(5H8/4C1)生物素4C1單抗在Derf1ELISA(EL-DF1)試劑盒中也有使用.EL-DP1推薦用于大多數(shù)常規(guī)灰塵和空氣樣本檢測Derp1。然而在EL-DP1實驗中一定程度 -
經歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當今細胞培養(yǎng)領域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細胞培養(yǎng)的要求,但對有些實驗卻不適合,如觀察一種生長因子對某種細胞的作用,這時需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長因子;又如需要測定某種細胞在培養(yǎng)過
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豬免疫球蛋白A(IgA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
豬免疫球蛋白A(IgA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定豬血清,血漿及相關液體樣本中免疫球蛋白A(IgA)量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬免疫球蛋白A(IgA)水平。用純化的豬免疫球蛋白A(IgA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入豬免疫球蛋白A(IgA),再與HRP標記的免疫球蛋白A(IgA)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸 -
人成纖維細胞活化蛋白(FAP)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
人成纖維細胞活化蛋白(FAP)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中成纖維細胞活化蛋白(FAP)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人成纖維細胞活化蛋白(FAP)水平。用純化的人成纖維細胞活化蛋白(FAP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入成纖維細胞活化蛋白(FAP),再與HRP標記的成纖維細胞活化蛋白(FAP)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TM -
隨著熒光檢測的普及,許多研究人員正考慮將westernblot的檢測方法從化學發(fā)光轉到多重熒光。這一趨勢背后有多個推動力。zui重要的是,熒光檢測能夠實現(xiàn)多重westernblot分析,每次能夠同時檢測幾個目標蛋白,而不再需要剝離和重新雜交。熒光的其他好處在于動態(tài)范圍更寬、信號穩(wěn)定性更好。熒光blotting的小貼士?抗體濃度應當優(yōu)化,在幾種不同稀釋度的抗體中孵育膜。選擇信噪比zui高的稀釋度。?從化學發(fā)光轉到熒光檢測時,一抗?jié)舛葢斣黾?;通常來說是增加2-5倍。二抗?jié)舛瓤赡芤残枰獌?yōu)化;1:5,
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實驗原理血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{紫色。根據(jù)顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。實驗方法材料:1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液2.1%H2O23.10%醋酸溶液4.分光光度計方法:1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。試劑(ml)測定管空白管2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液0.50.5患者血漿0.02/1%H2O20.50.5混
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ELISA實驗的原理似乎很簡單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個實驗。在實驗結束時,我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結果的信噪比。背景噪音會影響您對結果的判斷。如何降低ELISA的背景,下面有一些tips。洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊,其實很重要,因為如果未結合的材料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合