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KT0150Anti-beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉樣肽 1-40 (C端)抗體
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抗體的效價(jià)鑒定:
不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。蛋白質(zhì)與多肽的:
多肽:通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,它們的分子量低于10,000Da(Dalton,道爾頓),能透過(guò)半透膜,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽);10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽;由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì):生物體中廣泛存在的一類生物大分子,由核酸編碼的α氨基酸之間通過(guò)α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物。
就是:都是由20種基本氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別:
  蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡(jiǎn)寫(xiě)為:C、H、O、N等元素→氨基酸→多肽(肽鏈)→蛋白質(zhì)。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次,區(qū)別如下:
 ?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式,而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成(如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成),也可由多條肽鏈通過(guò)一定的化學(xué)鍵(肯定不是肽鍵,如二硫鍵、氫鍵等)連接而成(如胰島素由2條肽鏈組成、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等)。
 ?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異。多肽往往是無(wú)生物活性,而蛋白質(zhì)是具有生物活性的。多肽一般無(wú)活性(如蛋白質(zhì)在胃、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽),少數(shù)有活性(如抗利尿激素就是多肽類激素),與蛋白質(zhì)相比,多肽的分子量較小,沒(méi)有空間結(jié)構(gòu),一般無(wú)活性;蛋白質(zhì)的分子量較大,有空間結(jié)構(gòu),有活性(變性后活性下降或消失,活性消失叫做失活)
  因此,一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱為蛋白質(zhì)。
多肽合成:
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程,固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種:固
蛋白質(zhì)與多肽的:
多肽:通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,它們的分子量低于10,000Da(Dalton,道爾頓),能透過(guò)半透膜,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽);10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽;由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì):生物體中廣泛存在的一類生物大分子,由核酸編碼的α氨基酸之間通過(guò)α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物。
就是:都是由20種基本氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別:
  蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡(jiǎn)寫(xiě)為:C、H、O、N等元素→氨基酸→多肽(肽鏈)→蛋白質(zhì)。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次,區(qū)別如下:
 ?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式,而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成(如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成),也可由多條肽鏈通過(guò)一定的化學(xué)鍵(肯定不是肽鍵,如二硫鍵、氫鍵等)連接而成(如胰島素由2條肽鏈組成、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等)。
 ?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異。多肽往往是無(wú)生物活性,而蛋白質(zhì)是具有生物活性的。多肽一般無(wú)活性(如蛋白質(zhì)在胃、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽),少數(shù)有活性(如抗利尿激素就是多肽類激素),與蛋白質(zhì)相比,多肽的分子量較小,沒(méi)有空間結(jié)構(gòu),一般無(wú)活性;蛋白質(zhì)的分子量較大,有空間結(jié)構(gòu),有活性(變性后活性下降或消失,活性消失叫做失活)
  因此,一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱為蛋白質(zhì)。
多肽合成:
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程,固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種:固
單克隆抗體:
 ?。╩onoclonal antibody,McAb)克隆選擇學(xué)說(shuō):淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,一種細(xì)胞帶一種受體,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,使之活化,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,分泌同樣的抗體。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,如果要把這些抗體一一分開(kāi),用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),開(kāi)創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,兔單抗具有:首先,兔抗血清通常含有高親和力抗體,可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位;其次,兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原;第三,由于兔脾臟較大,可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),使得高通量篩選融合成
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類:
  按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。
  IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來(lái),聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬;
  IgG抗體激活補(bǔ)體,中和多種毒素。IgG持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng),是*能在母親妊娠期穿過(guò)胎盤(pán)保護(hù)胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,使新生兒得到保護(hù);
  IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜,中和感染因子。還可以通過(guò)母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,是在母乳中含量zui多,zui為重要的一類抗體;
  IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展。這也是引發(fā)速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)的抗體;
  IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,可能與B細(xì)胞的分化有關(guān)。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),分子量為175kD,主要由扁桃體、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,在個(gè)體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長(zhǎng),且對(duì)蛋白酶水解敏感,因此IgD半衰期很短,僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,除了表達(dá)SmIgD,抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時(shí),SmIgD逐br/>


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