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KTB4231Rabbit Anti-HRP 兔抗HRP (親和層析純化)
Rabbit Anti-HRP  兔抗HRP            (親和層析純化)
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【簡單介紹】
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【詳細(xì)說明】
Rabbit Anti-HRP 兔抗HRP (親和層析純化)

親和純化二抗IgG

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抗體結(jié)構(gòu):
  抗體是具有4條多肽鏈的對稱結(jié)構(gòu),其中2條較長、相對分子量較大的相同的重鏈(H鏈);2條較短、相對分子量較小的相同的輕鏈(L鏈)。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結(jié)形成一個由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,重鏈有μ、δ、γ、ε和α五種。 整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列。可變區(qū)位于"Y"的兩臂末端。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈,這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面,zui多由17個氨基酸殘基構(gòu)成,少則只有2 ~ 3個。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性。一個抗體分子上的兩個抗原結(jié)合部位是相同的,位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段(crystalline fragment,FC),糖結(jié)合在FC 上。
抗體的特異性鑒定 :
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,即該血清的特異性較好。
抗體規(guī)律:
 ?。?)初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體:當(dāng)抗原*次進(jìn)入機(jī)體時,需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體,且抗體產(chǎn)生的量也不多,在體內(nèi)維持的時間也較短。
  (2)再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體:當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后,開始時,由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合,可使原有抗體量略為降低。隨后,抗體效價迅速大量增加,可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍,在體內(nèi)留存的時間亦較長。
 ?。?)回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體:由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體,經(jīng)過一定時間后可逐漸消失。此時若再次接觸抗原,可使已消失的抗體快速上升。如再次刺激機(jī)體的抗原與初次相同,則稱為特異性回憶反應(yīng);若與初次反應(yīng)不同,則稱為非特異性回憶反應(yīng)。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時性的,短時間內(nèi)即很快下降。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:
  1、制備抗原。  
 2、選擇實(shí)驗(yàn)動物。
  3、動物免疫。  
 4、試取血進(jìn)行測試,看看是否成功免疫。
  5、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動物,采集全部血清。
  6、純化出抗體。  
 7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
  抗體的效價鑒定:
不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。


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