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伯樂(lè)電泳槽電場(chǎng)通過(guò)凝膠連接兩個(gè)緩沖腔
閱讀：775 發(fā)布時(shí)間：2021-5-27
根據(jù)電泳的原理，凝膠都是放在兩個(gè)緩沖腔之間，電場(chǎng)通過(guò)凝膠連接兩個(gè)緩沖腔。緩沖液和凝膠之間的接觸可以是直接的液體接觸，也可以間接通過(guò)凝膠條或?yàn)V紙條。管狀凝膠電泳和垂直板狀電泳大多采取直接液體接觸方式。這種方式可以有效地使用電場(chǎng)，但在裝置設(shè)計(jì)上有一些困難，如液體泄漏，電安全和操作麻煩等問(wèn)題。水平板狀電泳槽大多通過(guò)間接方式，用濾紙橋搭接。
以及最近使用緩沖液制作的凝膠條和濾紙條搭接，即半干技術(shù)，后種方式使裝置簡(jiǎn)化，操作也大大方便。
伯樂(lè)電泳槽常見(jiàn)問(wèn)題及解決辦法：
1、伯樂(lè)電泳槽紋理和托尾現(xiàn)
由于樣品溶解不佳引起的，克服的方法可以在加樣前離心，增加一些增溶輔助試劑如尿素。
2、蛋白帶過(guò)寬
與鄰近泳道的蛋白帶相連時(shí)由于加樣量太多，可以減少上樣量。
3、伯樂(lè)電泳槽電泳時(shí)間比正常要長(zhǎng)
可能由于凝膠緩沖系統(tǒng)和電極緩沖系統(tǒng)的PH選擇錯(cuò)誤，即緩沖系統(tǒng)的PH和被分離物質(zhì)的等電點(diǎn)差別太小，或緩沖系統(tǒng)的離子強(qiáng)度太高。
4、指示劑成微笑符號(hào)（指示劑前沿呈現(xiàn)向上的曲線形）
說(shuō)明凝膠的不均勻冷卻，中間部分冷卻不好，導(dǎo)致分子有不同的遷移率所致。
5、指示劑成哭臉?lè)?hào)（指示劑前沿呈現(xiàn)向下的曲線形）
由于電泳槽的裝置不合適，尤其是凝膠和玻璃板組成的“三明治”底部有氣泡或靠近隔片的凝膠聚合不*。
6、伯樂(lè)電泳槽凝膠時(shí)間不對(duì)
通常膠在60min，1H內(nèi)凝，如果凝的太慢，可能是TEMEN，APS劑量不夠或者失效。APS應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用，TEMED不穩(wěn)定，容易被氧化成黃色。如果凝的太快，可能是APS和TEMED用量過(guò)多，此時(shí)膠太硬易裂，電泳時(shí)易燒膠。