電泳儀知識(shí)大全
閱讀:838 發(fā)布時(shí)間:2022-8-5
電泳儀的原理
物質(zhì)分子在正常情況下一般不帶電,即所帶正負(fù)電荷量相等,故不顯示帶電性。但是在一定的物理作用或化學(xué)反應(yīng)條件下,某些物質(zhì)分子會(huì)成為帶電的離子(或粒子),不同的物質(zhì),由于其帶電性質(zhì)、顆粒形狀和大小不同,因而在一定的電場(chǎng)中它們的移動(dòng)方向和移動(dòng)速度也不同,因此可使它們分離。
若溶液里一電量為Q的帶電粒子 ,在場(chǎng)強(qiáng)為E 的電場(chǎng)中以速度υ 移動(dòng),則它所受到的電場(chǎng)力F 應(yīng)為:
F =QE (6-1)
根據(jù)斯托克司定律,在液體中泳動(dòng)的球狀粒子所受到的阻力F’為:
F’=6 ηrυ (6-2)
式中η為介質(zhì)的粘度系數(shù),r為粒子半徑。
當(dāng)二力平衡,即F =F’時(shí) ,粒子作勻速泳動(dòng),且有
υ=QE/6 ηr (6-3)
電泳儀是電泳分析的儀器,在使用過程中有很多需要注意的事項(xiàng):
1、在電泳儀通電后,禁止人體接觸電極、電泳物等可能帶電的部位,也不得到電泳槽中取放東西,如有必要,應(yīng)先切斷電泳儀電源,以免觸電。此外,電泳儀必須有好的接地端,以免漏電。
2、在總電流不超過儀器額定電流時(shí)(最大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響電泳儀壽命。
3、有些特殊情況需要檢視電泳儀儀表上電泳的輸入,可在穩(wěn)壓下空載開機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)荷才能開機(jī),否則電壓表指針會(huì)劇烈地跳動(dòng),容易造成不必要的人為損壞。
4、電泳儀開機(jī)后,請(qǐng)勿臨時(shí)增加或拔下輸出線插頭,以免發(fā)生短路,盡管儀器內(nèi)部附有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍可能造成電泳儀損壞。
5、因不同介質(zhì)支撐物電阻值不同,電泳儀運(yùn)作過程中流過的電流量不同,泳速及泳到結(jié)束的時(shí)間也不同,因此不能同時(shí)進(jìn)行不同介質(zhì)支撐物的電泳。
電泳儀的選購(gòu)標(biāo)準(zhǔn):
市面上銷售的電泳儀電源,按電壓分為高壓1500~5000V、中壓500~1500V、低壓500V以下三種;按電流分為大電流500mA~2000mA、中電流100~500mA、小電流100mA以下三種;按功率分為大功率200~400W、功率60~200W、小功率60W以下三種。
從電壓的角度來看,用于核酸(瓊脂糖)水平電泳、PCR電泳、DNA回收、印跡轉(zhuǎn)移等實(shí)驗(yàn)只需高電壓300V;用于蛋白垂直電泳、種子純度電泳、醋酸纖維膜電泳等需要使用高電壓600V左右的電泳儀;用于DNA測(cè)序(SSR分子標(biāo)記)、等點(diǎn)聚焦電泳、雙向電泳等要求高電壓3000V;用于DNA測(cè)序電泳(AFLP分子標(biāo)記)要求高電壓3800V。