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ELISA試劑盒之酶標(biāo)基本步驟是什么?
閱讀:1877 發(fā)布時(shí)間:2019-12-16ELISA試劑盒中的酶標(biāo)用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1.包被用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為110μgml。
在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml4℃過(guò)夜。次日棄去孔內(nèi)溶液用洗滌緩沖液洗3次每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌下同)。
2.加樣加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3.加酶標(biāo)抗體于各反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.51小時(shí)洗滌。
4.加底物液顯色于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml37℃1030分鐘。
5.終止反應(yīng)于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.結(jié)果判定可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果,反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng);陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺。
依據(jù)ELISA試劑盒檢測(cè)所呈顏色的深淺以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值在ELX808酶標(biāo)儀上于450nm(若以ABTS顯色則410nm)處以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍即為陽(yáng)性。
Cytological, physiological, and transcriptomic analyses of golden leaf
coloration in Ginkgo biloba L
Li et al. Horticulture Research (2018) 5:12
DOI 10.1038/s41438-018-0015-4
作者單位:揚(yáng)州大學(xué)
使用產(chǎn)品:有機(jī)氯ELISA試劑盒
3. Starvation during pregnancy impairs fetal oogenesis and folliculogenesis in offspring in the mouse
Wang et al. Cell Death and Disease (2018) 9:452
DOI 10.1038/s41419-018-0492-2
作者單位:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
使用產(chǎn)品:雌二醇ELISA試劑盒
Tissue factor pathway inhibitor gene transfer prevents vascular smooth muscle cell proliferation by interfering with the MCP-3/CCR2 pathway
Laboratory Investigation (2015) 95, 1246–1257
© 2015 USCAP, Inc All rights reserved 0023-6837/15
作者單位:哈爾濱醫(yī)科大學(xué)
使用產(chǎn)品:溴脫氧核苷尿嘧啶ELISA試劑盒
Toxicity of glyphosate in feed for weanling piglets and the mechanism of glyphosate detoxification by the liver nuclear receptor CAR/PXR pathway
Journal of Hazardous Materials,Available online 16 November 2019, 121707
doi.org/10.1016/j.jhazmat.2019.121707
作者單位:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
使用產(chǎn)品:SOD, GSH-Px, GST, CAT, GSH and MDA ELISA試劑盒
Enhancing methane production of anaerobic sludge digestion by
microaeration: Enzyme activity stimulation, semi-continuous reactor
validation and microbial community analysis
Bioresource Technology,Volume 289, October 2019, 121643
doi.org/10.1016/j.biortech.2019.121643
作者單位:上海電力大學(xué)
使用產(chǎn)品:α葡萄糖苷酶ELISA試劑盒