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切片的清洗方法及注意事項(xiàng)
閱讀:2327 發(fā)布時(shí)間:2015-12-30上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供免費(fèi)代做ELISA實(shí)驗(yàn),WB實(shí)驗(yàn)按樣收費(fèi)。各種技術(shù)問題可提供一對一的服務(wù)。昨日,我司技術(shù)部負(fù)責(zé)人歐陽技術(shù)在給中科院物理研究所高老師關(guān)于切片的清洗方法分析介紹到:為了防止一抗、二抗等試劑殘留而引起非特異性染色,所以適當(dāng)?shù)丶訌?qiáng)清洗(延長時(shí)間和增多次數(shù))尤為重要,一般要求在一抗孵育前的清洗是3 min*3次,而一抗孵育后的清洗均為5次*5 min。
注意事項(xiàng):
(1)單獨(dú)沖洗,防止交叉反應(yīng)造成污染。
(2)溫柔沖洗,防止切片的脫落??梢赃x擇用浸洗方式;
(3)沖洗的時(shí)間要足夠,才能*洗去結(jié)合的物質(zhì)。
(4)PBS的PH和離子強(qiáng)度的使用和要求。建議PH在7.4-7.6濃度是0.01 M。(中性及弱鹼性條件(PH7-8)有利于免疫復(fù)合物的形成,而酸性條件則有利于分解;低離子強(qiáng)度有利于免疫復(fù)合物的形成,而高離子強(qiáng)度則有利于分解)。