酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè),小鼠IL-1β酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè)

酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè),小鼠IL-1β酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè)測(cè)定在普通實(shí)驗(yàn)室便可進(jìn)行，常用的儀器設(shè)備包括加樣器、培養(yǎng)箱、酶標(biāo)讀數(shù)器等。按現(xiàn)有價(jià)格折算，酶標(biāo)儀的價(jià)格只及液閃儀的1/6至1/4，因此每測(cè)定一個(gè)樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法，還可在野外進(jìn)行，操作十分方便。

一、酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè),小鼠IL-1β酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè)參數(shù)規(guī)格

保存條件：2-8℃低溫保存

保質(zhì)期：6個(gè)月，所有試劑盒均提供批次。

試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。

二、選型

產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T

96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本

48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本

三、酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

四、酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè),小鼠IL-1β酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè)優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)

Elisa技術(shù)在上述方面表現(xiàn)出如下*性：

 （一）靈敏度高

雖然酶活性調(diào)節(jié)Elisa方法的靈敏度目前并不十分理想，但在酶活性放大Elisa中，檢測(cè)的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測(cè)所檢測(cè)的待測(cè)物分子數(shù)為1。已知1個(gè)摩爾濃度含6.02×1023個(gè)分子，那么理論推測(cè)酶活性放大Elisa方法的zui低檢測(cè)限可達(dá)1.7×10-24mol/L。雖然在實(shí)際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響，往往達(dá)不到這個(gè)水平（大于104個(gè)分子），但表明Elisa在靈敏度方面的改進(jìn)潛力是很大的。

（二）特異性強(qiáng)

從免疫反應(yīng)的角度來(lái)說(shuō)，Elisa與RIA的特異性應(yīng)該是*的。但在Elisa方法中，由于作用檢測(cè)指示劑的酶與其底物的反應(yīng)有專(zhuān)一性，從而增加了該方法的特異性。

 （三）對(duì)儀器設(shè)備要求不高，測(cè)定成本低

Elisa測(cè)定在普通實(shí)驗(yàn)室便可進(jìn)行，常用的儀器設(shè)備包括加樣器、培養(yǎng)箱、酶標(biāo)讀數(shù)器等。按現(xiàn)有價(jià)格折算，酶標(biāo)儀的價(jià)格只及液閃儀的1/6至1/4，因此每測(cè)定一個(gè)樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法，還可在野外進(jìn)行，操作十分方便。

 （四）方法快速、簡(jiǎn)便

均質(zhì)酶免疫測(cè)定方法操作時(shí)，所有反應(yīng)試劑均在同一體系內(nèi)進(jìn)行，不需任何分離步驟，操作十分簡(jiǎn)便、快速，數(shù)分鐘便能得出結(jié)果。某些定性Elisa試劑盒，如國(guó)外生產(chǎn)的某些奶牛fa情鑒定和ren娠診斷Elisa試劑盒，數(shù)分鐘時(shí)間便能完成一次測(cè)定。

 （五）試劑保存時(shí)間較長(zhǎng)

作為檢測(cè)指示劑用的酶和酶標(biāo)記物，在低溫或干燥條件下相對(duì)穩(wěn)定，可保存半年至數(shù)年之久。

 （六）自動(dòng)化程度高

Elisa由于不存在放射性同位素污染，因此，除加待測(cè)樣本需要人工操作外，其他各步驟均可用儀器自動(dòng)化完成。在這種自動(dòng)化條件下，平均每人每天可完成2000余個(gè)樣本的檢測(cè)工作。

 （七）方法種類(lèi)多

Elisa技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)，并能利用某些非免疫反應(yīng)試劑（如SPA、凝集素等）的作用，發(fā)展成為許多新方法。此外，發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因?yàn)椋?，用于Elisa技術(shù)的酶其種類(lèi)遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于可用作RIA檢測(cè)指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣，有希望開(kāi)發(fā)很多類(lèi)型的酶用于Elisa，并建立相應(yīng)的Elisa方法。相反，自然界的化學(xué)元素是有限的，放射性同位素的種類(lèi)更加有限。第二，由于酶的多樣性，酶作用底物也有多種多樣，與此相對(duì)應(yīng)的生色源或供氫體的種類(lèi)也有遠(yuǎn)大的開(kāi)發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?/span>

 （八）無(wú)放射性同位素污染

Elisa技術(shù)應(yīng)用酶促反應(yīng)作為檢測(cè)免疫反應(yīng)強(qiáng)度的依據(jù)，在終端測(cè)定中毋須接觸放射性同位素，根本不存在放射性污染問(wèn)題（某些為提高檢測(cè)靈敏度而建立的酶免疫放射底物方法除外）。

 鑒于Elisa技術(shù)與RIA技術(shù)相比具有以上8個(gè)方面的*性，尤其在污染和操作簡(jiǎn)便性方面，Elisa技術(shù)所具有的長(zhǎng)處有利于該項(xiàng)技術(shù)在生產(chǎn)和臨床實(shí)踐中推廣應(yīng)用。統(tǒng)計(jì)資料表明，盡管RIA技術(shù)比Elisa技術(shù)早5年誕生，但在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用還不及Elisa技術(shù)普及。原子能機(jī)構(gòu)在推廣應(yīng)用核技術(shù)的同時(shí)，也在推廣非放射性同位素標(biāo)記技術(shù)，以縮小“核擴(kuò)散”范圍。預(yù)計(jì)在將來(lái)，Elisa技術(shù)有逐漸取代RIA技術(shù)的趨勢(shì)。

五、酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè),小鼠IL-1β酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè)注意事項(xiàng)

1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

2. 洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。

3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。

5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。

6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。

7. 底物請(qǐng)避光保存。

8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。