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色譜分離條件優(yōu)化

閱讀:4153        發(fā)布時(shí)間:2014-5-28

一. 減小柱內(nèi)展寬,提高柱效
  1、流動(dòng)相:選用低粘度的流動(dòng)相,有利于增大組分在溶劑中的擴(kuò)散系數(shù)Dm,減少傳質(zhì)阻力。
        2、固定相:①粒度小,均勻,以減小渦流擴(kuò)散和流動(dòng)相傳質(zhì)阻力;②改進(jìn)結(jié)構(gòu),盡可能采用大孔徑和淺孔道的表面多孔型載體或全多孔微粒型載體,減少滯留流動(dòng)相傳質(zhì)阻力。
  3、流速:從H-U曲線可知,HPLC的*流速在流速很小處,減少流速有利于提高柱效,但在實(shí)踐中為加快分析速度,常采用比*流速高數(shù)倍的流速。
  4、柱溫:適當(dāng)提高柱溫,可降低流動(dòng)相粘度,減少傳質(zhì)阻力,但柱溫升高將使分辨率降低,柱壽命短,易產(chǎn)生氣泡,一般在室溫下進(jìn)行。
  二. 柱外展寬
  柱外譜帶展寬又稱“柱外效應(yīng)”,系指從進(jìn)樣點(diǎn)到檢測(cè)池之間除柱子本身以外的所有死體積所引起的色譜峰展寬,柱效下降。可分為:
  1、柱前展寬  主要由進(jìn)樣引起,減小進(jìn)樣器的死體積,用閥門進(jìn)樣可減少柱前譜帶展寬,提高柱效。
  2、柱后展寬  主要由接管、檢測(cè)器流通池體積及檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間等因素所引起。因此,盡可能用短而內(nèi)徑細(xì)的接管,減少流通池體積,改進(jìn)檢測(cè)器和記錄系統(tǒng)的響應(yīng)速度等都是克服柱后展寬的途徑。
 

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