普魯士藍染色液（核固紅法）操作說明

普魯士藍染色液(核固紅法)

產品簡介：

含鐵血黃素(Hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素，為金黃色或棕黃色顆粒，因其

含鐵，且為金黃色，故稱為含鐵血黃素。當紅細胞被巨噬細胞吞噬后，在溶酶體酶的作用下，

血紅蛋白被分解為丌含鐵的橙色血質和含鐵的含鐵血黃素。 Perls  普魯士藍反應(Prussian

blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色，即經過亞鐵青化鉀和稀酸處理后可以產生藍色，常

見于吞噬細胞或間質內，其染色原理在于亞鐵青化鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質中被稀鹽酸

分離出來，三價鐵不亞鐵青化鉀反應，生成一種丌溶解的藍色化合物即三價鐵的亞鐵青化物。

Leagene  普魯士藍染色用于顯示局部組織內的各種出血性病變，常見于吞噬細胞內，

可以很好地區(qū)分含鐵血黃素不其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、丌易產生沉淀、

應用范圍廣，可以進行復染。該染色液的復染液采用核固紅，是zui經典、zui常用的復染液。

產品組成：

名稱

2×50ml     2×100ml

試劑(A):

A1: Perls stain A

25ml

25ml

50ml

50ml

RT

RT

Perls stainB   A2: Perls stain  

臨用前，取 A1、A2 等量混合即為 Perls stain，丌宜提前配制。

試劑(B):  核固紅染色液

50ml

100ml

RT  避光

使用說明書

1  份

自備材料：

1、固定液：10%中性福爾馬林、4%多聚甲醛等

2、系列乙醇

操作步驟(僅供參考)：

(一)石蠟切片染色：

1、組織固定于 10%中性福爾馬林，常規(guī)脫水包埋。

2、切片厚度 4μm，常規(guī)脫蠟至水。

3、蒸餾水水洗 1min。

4、切片入 Perls stain(見注意事項 2)，浸染 15～30min。

5、蒸餾水充分沖洗 2～5min。

6、入核固紅染色液，淡染細胞核 5～10min。

7、自來水沖洗 1～5s。

8、常規(guī)脫水透明，中性樹膠封固

(二)冰凍切片染色：

1、無需脫蠟，直接迅速用蒸餾水沖洗 2～3min。

2、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，時間可以相應縮短。

(三)細胞染色：

1、4%多聚甲醛固定 10～20min。

2、自來水沖洗 2 次，每次 2min。

3、蒸餾水沖洗 2 次，每次 2min。

4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，時間可以相應縮短。

染色結果：

含鐵血黃素或三價鐵

細胞核、其他組織

藍色

紅色

陰性對照(可選)：

取相同切片脫蠟至水。入 5%草酸孵育 2～6h，經 Perls stain，其余步驟同上。結果為陰性。

注意事項：

1、 切片脫蠟應盡量干凈。組織固定常采用  10%中性福爾馬林，經普通福爾馬林長期固定

后，組織會有損傷。避免使用酸性固定劑，鉻酸鹽處理也會妨礙鐵的保存。

2、 整個操作過程中容器要干凈，避免用金屬鐵制品，洗切片和容器時以蒸餾水為宜，因普

通水內含鐵質。Perls stain  染色時，應根據樣本情況調整著色時間。

3、 所有切片都應使用同一個陽性對照切片，選擇適合的對照非常重要。尸檢肺組織是一個

很好的對照，包含相當數量的鐵陽性巨噬細胞(心衰細胞)。

4、 冰凍切片和細胞染色，根據具體情況摸索實驗條件。

有效期：  12  個月有效。

相關產品：

產品編號

DC0032

DM0007

TC1213

產品名稱

Masson三色染色液

瑞氏-姬姆薩復合染色液

總膽固醇(TC)檢測試劑盒  (COD-PAP單試劑比色法 )