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上海源葉生物科技有限公司
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免疫學(xué)技術(shù)在檢驗(yàn)和檢疫中應(yīng)用的原理
2011-8-3 閱讀(670)
借助抗原和抗體在體外特異結(jié)合后出現(xiàn)的各種現(xiàn)象,可以對(duì)樣品中的抗原或抗體進(jìn)行定性、定量、定位的檢測(cè)。
抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)并不是化學(xué)反應(yīng),而是非共價(jià)的可逆結(jié)合??乖瓫Q定簇和抗體分子可變區(qū)所形成的互補(bǔ)構(gòu)型,造成兩種分子間具有較強(qiáng)的親和力??臻g構(gòu)型互補(bǔ)程度不同,抗原分子和抗體分子之間結(jié)合力強(qiáng)弱也不同?;パa(bǔ)程度高,則親和力強(qiáng)。此外,反應(yīng)溫度、酸堿度和離子濃度對(duì)抗原和抗體分子上各基因的解離性和電荷特性也有重要的影響,抗體與抗原決定簇之間的結(jié)合力大小可用親和力來(lái)表示。高親和力的抗體與抗原的結(jié)合力強(qiáng),即使抗原濃度很低時(shí)也有較多的抗體結(jié)合抗原形成免疫復(fù)合物。
根據(jù)抗原—抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物的性狀與活性特點(diǎn),可以對(duì)標(biāo)本中的抗原或抗體進(jìn)行定性、定位或定量的檢測(cè)。定性和定位檢測(cè)比較簡(jiǎn)單,即用已知的抗體和待檢樣品混合,經(jīng)過(guò)一段時(shí)間,若有免疫復(fù)合物形成的現(xiàn)象發(fā)生,就說(shuō)明待檢樣品中有相應(yīng)的抗原存在。若無(wú)預(yù)期的現(xiàn)象發(fā)生,則說(shuō)明樣品中無(wú)相應(yīng)的抗原存在。同理也可用已知的抗原檢測(cè)樣品中是否有相應(yīng)抗體。對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定量檢測(cè)時(shí),反應(yīng)中加入抗原和抗體的濃度與形成免疫復(fù)物的濃度呈函數(shù)關(guān)系。
可根據(jù)免疫復(fù)合物產(chǎn)生的多少來(lái)推算樣品中抗原(或抗體)的含量。在一定的反應(yīng)條件下,加入一定濃度的已知抗體(或抗原),反應(yīng)產(chǎn)生的免疫復(fù)合物多少與待檢樣品中含有相應(yīng)抗原(或抗體)量成正比。可用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)推算出樣品中抗原(或抗體)的含量。如免疫單向擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫比濁試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫檢測(cè)等都屬于這類(lèi)方法。