上海源葉生物科技有限公司
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抗體片段及其衍生形式
2012-6-9 閱讀(502)
1.雙特異性抗體 將兩套輕鏈、重鏈基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞中,選擇合適的抗體恒定區(qū)及Ig類(lèi)型,可獲得產(chǎn)量大、均一性和高純度的雙特異性抗體。另外,以化學(xué)交聯(lián)技術(shù)或雜交—雜交瘤技術(shù)也可獲得雙特異性抗體。
2.Fab抗體 Fab抗體是由重鏈Fd(即VM+CHl)和完整輕鏈通過(guò)二硫鍵結(jié)合而成的異二聚體,僅含一個(gè)抗原結(jié)合部位。將重鏈Fd和完整輕鏈的編碼基因連接,5,端融合細(xì)菌蛋白信號(hào)肽基因可在大腸桿菌內(nèi)分泌型表達(dá),形成完整的立體折疊和鏈內(nèi)、鏈間二硫鍵,保持Fab片段的功能。
3.Fv抗體 其制備原理是:分別構(gòu)建含VH和VL基因的載體,共轉(zhuǎn)染細(xì)胞,使之分別表達(dá)并組裝成功能性Fv抗體;或在載體中的VH和VL之間設(shè)置終止密碼,分別表達(dá)兩個(gè)小分子片段,再通過(guò)非共價(jià)鍵結(jié)合而形成Fv。
4.單鏈抗體 其制備原理為:用適當(dāng)?shù)墓押塑账峤宇^(1inker)連接輕鏈和重鏈可變區(qū)基因,使之表達(dá)單一的多肽鏈而形成單鏈抗體(single chain fragment variable,ScFv)。多肽鏈能自發(fā)折疊成天然構(gòu)象,保持Fv的特異性和親和力。
5.單域抗體 制備原理為,將抗體重鏈V區(qū)通過(guò)基因工程方法表達(dá),獲得僅含VH片段的抗體。單域抗體(single domain antibody)與抗原結(jié)合的能力及其穩(wěn)定性,與*抗體基本一致。
6.zui小識(shí)別單位(minimal recognition units,MRU) 僅含可變區(qū)中單一CDR結(jié)構(gòu),分子質(zhì)量?jī)H為完整抗體的l%左右,但可結(jié)合相應(yīng)抗原。