一、尼康生物顯微鏡的使用

（一）使用環(huán)境與習慣

1、使用環(huán)境

顯微鏡的工作場所應當清潔、干燥、無震動、無腐蝕性氣體存在。

2、工作習慣

（１）臺面和凳子的高度要適當。

（２）鏡檢時，即便用單目顯微鏡，也須兩眼同時睜開，用左眼觀察。以便右眼繪圖或記錄。如一只眼睜，一只眼閉，眼睛容易疲勞，無法久看。工作時間較長時，可兩眼輪流觀察。

（二）尼康生物顯微鏡使用前的準備

1、光學系統(tǒng)的安裝

對新購或已經(jīng)卸掉光學系統(tǒng)的顯微鏡，使用前必須先將顯微鏡安裝起來。安裝時，為了防止向下掉灰塵，應按照先上后下的順序，即按照目鏡、物鏡、聚光鏡、反射鏡的順序來安裝。

安裝物鏡時，應先將鏡筒升高或載波物臺下降，使轉換器與載物臺之間保持一定的距離。然后，握往物鏡，把它放入轉換器的螺絲口處，先略向反時針方向旋轉，待物鏡配上絲紋后，再按順時針方向旋入，旋至中等程度松緊即可。安裝物鏡時，應根據(jù)物鏡的放大倍數(shù)，從小到大順時針安裝。轉換物鏡時，不要用手推著物鏡旋轉，那樣會使物鏡的光軸歪斜。好用手捏著轉換器的轉動盤旋轉，或用手扶著與物鏡轉換器銜接處的滾花外圓旋轉。

目鏡和物鏡裝好后，再將聚光鏡插入載物臺下面的聚光器支架內。插入的高度應使聚光器升至高時，聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺的平面，以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰。然后，將聚光器的固定螺絲旋緊。對非電光源的顯微鏡來說，后要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內。

2、校正光軸

校正光軸的意義在于使物鏡、目鏡、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點重合在一條直線上。所以又叫做合軸調節(jié)或中心調節(jié)。如果光軸歪斜，會使像差增大，分辨率和清晰度都要下降。

檢查方法是將可變光欄開至大，把低倍物鏡旋入光軸，降低鏡筒，使物鏡與載物臺之間的距離小于該物鏡的工作距離（５mm以下）。不放標本，調節(jié)反射鏡的角度，使視場亮；或調節(jié)光源燈的亮度，使視場明暗合適。

然后，拔掉目鏡，直接從鏡筒中觀察。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開數(shù)次，當光欄關至小時，光欄的像（此時只有一點點）應正好落在物鏡通光孔的中心。當光欄開大到一定程度時，光欄孔的像應正好與物鏡通光孔的黑圈相重合。若符合上述兩個條件，說明它們“合軸"。否則，就需要調整。

目鏡和物鏡都是固定的，無法進行調整。合軸調節(jié)主要是調整聚光鏡的位置。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個光軸校正螺絲，調節(jié)這兩個螺絲，即可合軸。另一種聚光器是由框架上三個相隔120°的螺絲支持住，其中一個裝有彈簧，可以伸縮；另外兩個螺絲，可以旋動。調整這兩個螺絲，便可合軸。

顯微鏡的光軸校正好后，如果沒有拆下聚光器或其它特殊原因，不必經(jīng)常校正。

3、準備好標本

準備好高質量的標本備用。

（三）尼康生物顯微鏡反射鏡、聚光器的使用方法和對光方法

1、調光

對采用反射鏡的的顯微鏡，一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時，才使用凹面反射鏡。

采用電光源的顯微鏡，將光亮調合適即行。

2、聚光器的用法

（１）聚光器高度的調節(jié) 一般的聚光鏡，在平行光照射的情況下，其焦點落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處。當使用高倍鏡或油鏡時，由于放大率大，鏡像亮度小，需要較強的照明。因此，應把聚光器升至高，以便使聚光鏡的焦點正好落在標本平面上。但在使用低倍物鏡時，可將聚光器適當下降。

（２）可變光欄的用法 可變光欄起兩個作用。一是控制射向標本的光通量；二是改變聚光器的數(shù)值孔徑。在這兩個作用中，后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用，從原則上說，聚光器的數(shù)值孔徑應與物鏡的相同。否則，分辨率或清晰度會受影響。

3、對光方法

對電光源顯微鏡來說，使用時，只要將光調節(jié)在合適的亮度即行。不需要進行對光。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說，要想獲得良好的觀察效果，必須充分利用照明光線。因此，鏡檢之前應先對光。對光時，將低倍鏡旋入光軸，聚光器適當升高，可變光欄開至大。然后，從目鏡中觀察，同時轉動反射鏡，直至視場明亮、清晰為止。如果利用自然光，則盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾。

（四）物鏡的正確調焦

對光完成后或調節(jié)合適光亮后，升高鏡筒或降低載物臺，將標本玻片夾在移動器即標本夾上，并將欲檢查的部分移至載物臺通光孔的中央，然后開始調焦。

無論作何種檢查，均應從低倍鏡開始。調焦時，先用粗動手輪將鏡筒下降，使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的工作距離（５mm以下）。為了避免物鏡壓在標本玻片上，可從側面窺視。然后，一邊從目鏡中觀察視野，一邊利用粗動手輪將鏡筒徐徐上升，待初見物像后，改用微動手輪作精細調焦，直至物像清晰為至。低倍物鏡的視場大，有利于觀察標本的全貌。也可利用移動器或縱、橫向調節(jié)手輪尋覓所觀察的目標。如有必要，可將尋得的目標移至視場的中心，為高倍鏡觀察作好準備。

從低倍物鏡轉換為高倍物鏡時，如果物鏡是顯微鏡的原配，所用的載玻片、蓋玻片又符合標準，一般都可以進行“等高轉換"。即轉換后，只要稍微調節(jié)一下微調旋鈕，即可看到清晰的圖像。但油鏡