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中級(jí)會(huì)員 | 第15年

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ELISA實(shí)驗(yàn)包被溫度和時(shí)間

時(shí)間：2018/7/11閱讀：8592
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ELISA實(shí)驗(yàn)包被溫度和時(shí)間

 

聚本乙烯載體中加入定量的蛋白質(zhì)包被液后，多數(shù)放在4℃冰箱過(guò)一夜，讓固相表面充分吸附，或用37℃孵育2h也可以達(dá)到同樣的吸附效果，但37℃包被2~3h與1h，兩者后測(cè)得的吸光度值相差不顯著。 蛋白質(zhì)吸附于聚苯乙烯酶標(biāo)板的動(dòng)力學(xué)研究表明： 加入包被液后1MIN,  固相上便發(fā)生吸附作用，吸附量與蛋白質(zhì)濃度， 包被時(shí)間有關(guān)。 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)濃度為5ug/mL時(shí)，包被60MIN出現(xiàn)明顯吸附，12h后吸附量不再隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加： 蛋白質(zhì)濃度為10ug/mL 和20ug/mL時(shí)， 兩者的吸附作用類似， 包被3min 便出現(xiàn)明顯吸附， 6h后吸附*， 5min 的吸附量為6min的30%

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