Western Blot Ladder Pen常見問題及解決方法

Western Blot Ladder Pen

目錄號：K2502

保存條件：4℃保存。

規(guī)格說明：1支

產(chǎn)品簡介

　　蛋白免疫印跡（WB）是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實驗方法，經(jīng)常用于檢測抗體和抗原之間的特異性，而且能夠?qū)δ康牡鞍走M行定性或定量分析研究。但是在試驗中，抗原或者抗體往往都不是單一的成分，這些可能會導(dǎo)致在最終底片曝光出多條條帶，或出現(xiàn)一些不明分子量的條帶，或者目的條帶的位置都不能確定。因此確定這些條帶的分子量對我們進行下一步的分析就顯得非常重要。

　　目前，市場上有一些預(yù)染Marker，能很好監(jiān)測我們的轉(zhuǎn)膜效率，電泳轉(zhuǎn)膜后能在雜交膜上看到Marker相應(yīng)的條帶，但是這些Marker 最終不能在底片上曝出條帶。

　　Western Blot Ladder Pen 正是要為您解決這個問題，通過轉(zhuǎn)膜后對著預(yù)染Marker或經(jīng)過麗春紅染色確定的非預(yù)染Marker的各條帶進行相應(yīng)的標(biāo)記，最終這些筆跡都能在目的位置曝光出相應(yīng)的條帶，用作分子量標(biāo)準(zhǔn)。同時也可以用它在膜上做其它標(biāo)記，或者用作陽性對照。

注意事項

1．本產(chǎn)品適用于HRP底物系統(tǒng)。

2．WB Ladder Pen使用完成后，請水平放置于4℃，請勿凍存于-20℃。

3．使用前請先將WB Ladder Pen在紙上畫幾筆之后再在膜上做相應(yīng)的標(biāo)記。

4．標(biāo)記過程中請勿用力太大，以免破壞膜的結(jié)構(gòu)，輕劃即可。

5．隨著筆使用時間的增加，信號可能會逐漸減弱。

                本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途

操作步驟

    1．電泳的過程中，可以使用預(yù)染蛋白Marker或者非預(yù)染蛋白Marker。

    2．常規(guī)的轉(zhuǎn)膜后，將膜取下。

       a  使用預(yù)染蛋白Marker的NC膜：去離子水漂洗膜后，使用上下兩層濾紙或者衛(wèi)生紙吸掉膜上多余的液體（請勿將膜吸的過干）。

       b  使用非預(yù)染蛋白Marker的NC膜：麗春紅染膜后，用鉛筆將非預(yù)染蛋白Marker的各個條帶標(biāo)記。TBST漂洗膜，以*去掉膜上的麗春紅，使用上下兩層濾紙或者

       衛(wèi)生紙吸掉膜上多余的液體（請勿將膜吸的過干）。

    3．使用WB Ladder Pen在膜上做好相應(yīng)的標(biāo)記（輕劃即可），放置15秒之后將膜放置

       于封閉液中封閉。

    4．按常規(guī)步驟進行后續(xù)的WB試驗。

問題及解決方法

              問題                             推薦解決方法

                                             1. 減少曝光時間。

              信號太強

                                             2. 同時多壓幾張底片。

                                             1. 換一支新的筆。

        沒有信號或者信號太弱

                                             2. 標(biāo)記時在對應(yīng)位置多劃幾筆。