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2012-5-17 閱讀(3443)
31. 細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境要求有一定濕度，必須加水！我的小經(jīng)驗(yàn)是： 1、雙蒸水裝在5L瓶中，2、高溫滅菌，3、移進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室，在紫外照射下冷卻，4、6小時(shí)后，在加入培養(yǎng)箱中使用。如果發(fā)現(xiàn)托盤(pán)中的說(shuō)有白色漂浮物存在是，盡量吸干?。ù宋锟紤]是霉菌污染）;還有如果有條件，就是定期75％酒精大清潔！我一般2個(gè)月清潔一次?。ò?xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室）這樣在無(wú)菌操作下，基本保證你免除污染！！
32. 培養(yǎng)箱內(nèi)不加水是不正規(guī)的，因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境要求有一定濕度。我們培養(yǎng)細(xì)胞不僅經(jīng)常保持有水，而且培養(yǎng)液中不加任何抗生素。只要無(wú)菌操作過(guò)關(guān)，不會(huì)發(fā)生細(xì)菌污染。
33. 我們實(shí)驗(yàn)室平常培養(yǎng)箱的消毒方法：（清潔前開(kāi)紫外30分鐘）1、隔板的清潔：先將隔板卸下，用干凈紗布沾新潔而滅擦兩遍；2、箱內(nèi)壁用新潔而滅擦拭后再?lài)?5％酒精，關(guān)門(mén)熏蒸15分鐘；3、盛蒸餾水的盤(pán)子：把盤(pán)里的水倒掉，用新潔而滅擦拭，干后倒入三蒸水；4、裝好板后，再?lài)?5％酒精關(guān)門(mén)熏蒸30分鐘。5、培養(yǎng)室開(kāi)紫外照30分鐘以上。
34. 我們實(shí)驗(yàn)室是將全部隔板卸下，新潔而滅擦拭，放在超凈工作臺(tái)內(nèi)紫外殺菌，CO2孵箱內(nèi)用紫外燈照射12h以上。
35. 推薦方法：拆卸隔板，新潔兒滅搽3次，然后酒精搽3次，紫外下面照2小時(shí)，然后裝上隔板，箱壁同樣處理，打開(kāi)箱子，用小紫外燈或房間紫外燈照2小時(shí)。注意要搽頂部的螺旋槳。裝好后，噴酒精即可。另外，還是用用硫酸銅比較好，飽和溶液放置在箱子底部。屢試屢爽，大約可以管3-4個(gè)月沒(méi)有問(wèn)題。如有效，請(qǐng)斑竹加分，謝謝！
36. 加硫酸銅的目的是為了防止真菌的生長(zhǎng),但硫酸銅容易改變孵箱pH值,所以建議不加硫酸銅,直接加蒸餾水即可,保持孵箱濕度.
37. 前一段時(shí)間培養(yǎng)箱里老是有散在的細(xì)胞霉菌污染。培養(yǎng)箱高溫消毒后，現(xiàn)在打開(kāi)，發(fā)現(xiàn)里面那扇玻璃門(mén)和墊圈會(huì)有大量水汽，培養(yǎng)瓶外壁也有。請(qǐng)問(wèn)是怎么回事？細(xì)胞還能養(yǎng)嗎？是因?yàn)榕囵B(yǎng)箱門(mén)的加熱故障或設(shè)置錯(cuò)誤，導(dǎo)致門(mén)的溫度與箱內(nèi)溫度不一樣，所以引起玻璃門(mén)結(jié)水汽。對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)沒(méi)多大的影響，因?yàn)橄鋬?nèi)的溫度是正常的。
38. 這種情況很常見(jiàn)，可以用以下方法解決：往水盤(pán)里的水加入適量的硫酸銅，攪拌均勻即可，因?yàn)榱蛩徙~是重金屬鹽，可以達(dá)到殺菌效果；另外也可以加10％的新吉爾滅等無(wú)刺激性的消毒物質(zhì)。注意，千萬(wàn)不能直接往水盤(pán)里加自來(lái)水，因?yàn)樽詠?lái)水里有很多潛在的霉菌等，一旦條件溫和它們就會(huì)迅速繁殖，是用煮開(kāi)的蒸餾水。注意了這些細(xì)節(jié)，問(wèn)題就迎刃而解了
