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光學(xué)顯微鏡原理及構(gòu)造

2019-5-23  閱讀(3277)

顯微鏡是研究微生物學(xué)的重要工具之一,根據(jù)不同的研究目的和要求,可以分別選用普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡和電子顯微鏡等,在食品微生物檢測(cè)中,以普通光學(xué)顯微鏡(簡(jiǎn)稱顯微鏡)為常用。

光學(xué)顯微鏡是利用光學(xué)原理,把人眼所不能分辨的微小物體放大成像,以供人們提取微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。光學(xué)顯微鏡就是利用表面為曲面的光學(xué)透鏡使物體放大成像這一原理,把微小物體放大到人眼足以觀察的尺寸。

光學(xué)顯微鏡通常采用兩級(jí)放大,分別由物鏡和目鏡完成。被觀察物體位于物鏡的前方,被物鏡做級(jí)放大后成,倒立的實(shí)像,然后此實(shí)像再被目鏡做第二級(jí)放大成虛像,人眼看到的就是一虛像,而顯微鏡的總放大倍率就是物鏡放大倍率和目鏡放大倍率的乘積。

放大倍率是指直線尺寸的放大比,而不是面積比。顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率,顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個(gè)物點(diǎn)的小間距。分辨率和放大倍率是兩個(gè)不同的但又相互有關(guān)聯(lián)的概念。

當(dāng)選用的物鏡分辨率不夠高(數(shù)值孔徑不夠大)時(shí),顯微鏡不能分清物體的微細(xì)結(jié)構(gòu),此時(shí)即使過度地增大放大倍率,得到的也只是一個(gè)輪廓大但細(xì)節(jié)不清晰的圖像,稱為無(wú)效放大倍率。反之如果分辨率已經(jīng)滿足要求而放大倍率不足,則顯微鏡雖已具備分辨能力,但因圖像太小而仍然不能被人眼清晰視見。所以為了充分發(fā)揮顯微鏡的分辨能力,應(yīng)使數(shù)值孔徑與顯微鏡總放大倍率合理匹配.

顯微鏡的構(gòu)造:光學(xué)部分

1.物鏡

該鏡頭下端接近被檢物體,為顯微鏡上的主要光學(xué)裝置。由多塊透鏡組成。一般顯微鏡具有3個(gè)-4個(gè)物鏡,分成干燥系和油鏡兩組,干燥系又按放大倍數(shù)分為低倍鏡和高倍鏡。各物鏡放大率由其外形辨認(rèn),鏡頭長(zhǎng)度越大,鏡片口徑越小,放大倍數(shù)愈大;反之,放大倍數(shù)小。油鏡頭的下緣,一般刻有一圈黑線。此外,各物鏡上都刻有放大倍數(shù)、孔徑數(shù)等標(biāo)志

2.目鏡

目鏡重要的光學(xué)部分之一,和鏡檢者的眼睛接近。目鏡由兩塊透鏡組成,其上刻有倍數(shù)。為便于指出物象,常在鏡中裝黑色細(xì)絲一條,作為指針。

3.聚光器

聚光器位于載物臺(tái)下方的次臺(tái)上,由數(shù)個(gè)透鏡組成。能上下移動(dòng),調(diào)節(jié)并集聚由光源提供的光線,使集中于載物玻片上。

4.光源

光源提供觀察所需光線,裝在顯微鏡的下方。

顯微鏡的構(gòu)造:機(jī)械部分

1.鏡臂

鏡臂在鏡筒后面,便于顯微鏡搬移,并作為將鏡筒傾斜時(shí)的握持部。

2.底座

顯微鏡的底座用以支持全鏡,呈馬蹄形。

3.載物臺(tái)

在物鏡下方,呈方形或圓形,用以載放被檢物體。中央有孔,可以透光。臺(tái)上裝有一彈簧夾,鏡檢時(shí)可以固定標(biāo)本片。有的載物臺(tái)上裝有載物臺(tái)調(diào)解旋鈕,捻轉(zhuǎn)旋鈕,能使標(biāo)本前后左右移動(dòng).

4.光圈

在聚光器下方,可以任意開閉,用以調(diào)節(jié)射入集光線的多寡。

5.電源和亮度調(diào)節(jié)旋鈕

用于開啟光源和調(diào)節(jié)光源的亮度。

6.粗準(zhǔn)焦螺旋和細(xì)準(zhǔn)焦螺旋

粗準(zhǔn)焦螺旋可使載物臺(tái)較大距離地升降。細(xì)準(zhǔn)焦螺旋可以地調(diào)節(jié)距離。



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