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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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熒光顯微鏡注意事項(xiàng)

時(shí)間:2021/7/12閱讀:1666
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(1)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作,不要隨意改變程序。
(2)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后,接上電源,點(diǎn)燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后,眼睛*適應(yīng)暗室,再開(kāi)始觀察標(biāo)本。
(3)防止紫外線對(duì)眼睛的損害,在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上。
(4)檢查時(shí)間每次以1~2h為宜,超過(guò)90min,超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,最多不得超過(guò)2~3h。
(5)熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時(shí)間,保護(hù)光源。天熱時(shí),應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開(kāi)始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí),須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。
(6)標(biāo)本染色后立即觀察,因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時(shí)間,防止封裱劑蒸發(fā)。長(zhǎng)時(shí)間的激發(fā)光照射標(biāo)本,會(huì)使得熒光衰減和消失現(xiàn)象,故應(yīng)盡可能縮短照射時(shí)間。暫時(shí)不觀察時(shí)可用擋光板遮蓋激發(fā)光。
(7)標(biāo)本觀察時(shí)候應(yīng)采用無(wú)熒光油,應(yīng)避免眼睛直視紫外光源。
(8)電源應(yīng)安裝穩(wěn)壓器,電壓不穩(wěn)會(huì)降低熒光燈的壽命。
熒光顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別
熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別:
1.照明方式通常為落射式,即光源通過(guò)物鏡投射于樣品上;
2.光源為紫外光,波長(zhǎng)較短,分辨力高于普通顯微鏡;
3.有兩個(gè)特殊的濾光片,光源前的用以濾除可見(jiàn)光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護(hù)人目。
熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種,主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。
熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。

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