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光學(xué)顯微鏡中油鏡的原理

2024-11-22 閱讀(670)

油鏡:光學(xué)顯微鏡之一,使用時(shí),鏡頭浸入油中(通常是香柏油),用于觀察較細(xì)微的結(jié)構(gòu),是實(shí)驗(yàn)室常用的顯微鏡之一,清晰度略高于普通光學(xué)顯微鏡,用于觀察衣原體,細(xì)菌,細(xì)胞器等。

油鏡的透鏡很小,光線(xiàn)通過(guò)玻片與油鏡頭之間的空氣時(shí),因介質(zhì)密度不同,發(fā)生折射或全反射,使射入透鏡的光線(xiàn)減少,物象顯現(xiàn)不清。若在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏油(n=1.515),則使進(jìn)入透鏡的光線(xiàn)增多,視野亮度增強(qiáng),使物象明亮清晰。
由于細(xì)菌體積微小,故在細(xì)菌的形態(tài)學(xué)研究中,經(jīng)常需要借助顯微鏡油鏡,才能比較清楚地進(jìn)行觀察。因此,必須熟練地掌握油鏡的使用及保護(hù)法。

油鏡使用注意:
(1)在使用油鏡之前,必須先經(jīng)低、高倍鏡觀察,然后將需進(jìn)一步放大的部分移到視野的中心。
(2)將集光器上升到最高位置,光圈開(kāi)到最大。
(3)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使高倍鏡頭離開(kāi)通光孔,在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)油鏡,在轉(zhuǎn)換油鏡時(shí),從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離,使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。
(4)用左眼觀察目鏡,并慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。如果不出現(xiàn)物象或者目標(biāo)不理想要重找,在加油區(qū)之外重找時(shí)應(yīng)按:低倍→高倍→油鏡程序。在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按:低倍→油鏡程序,不得經(jīng)高倍鏡,以免油沾污鏡頭。
(5)油鏡使用完畢,先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去,然后再用干擦鏡紙擦干凈。

油鏡的使用法:
1、使用顯微鏡油鏡時(shí),必須將顯微鏡端正直立桌上,不得將鏡臂彎曲,使載物臺(tái)傾斜,以免香柏油流溢,影響觀察,污染臺(tái)面。
2、對(duì)光:采用天然光為光源時(shí),宜用平面反光鏡;若用人工燈光時(shí),則用凹面鏡。
首先打開(kāi)光圈,轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線(xiàn)集中于集光器??筛鶕?jù)需要,上下移動(dòng)集光器和縮放光圈,以獲得最佳光度。
一般用低倍鏡或高倍鏡觀察物象或用油鏡檢查不染色標(biāo)本時(shí),需下降集光器并適當(dāng)?shù)乜s小光圈,使光度減弱;若用油鏡檢查染色標(biāo)本時(shí),光度宜強(qiáng)。應(yīng)將顯微鏡亮度開(kāi)關(guān)調(diào)至最亮,光圈全部打開(kāi),集光器上升至與載物臺(tái)相平。
3、調(diào)焦距:
A、將標(biāo)本片放載物臺(tái)上,用標(biāo)本推進(jìn)器固定,將欲檢部分移至接物鏡下。先用低倍鏡找出標(biāo)本的位置,然后提高鏡筒,在標(biāo)本的待檢部位滴鏡油一滴,再換油鏡觀察。
B、轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使載物臺(tái)徐徐上升(或使鏡筒漸漸下降),直至油鏡頭浸沒(méi)至油中。此時(shí)眼睛應(yīng)從側(cè)面觀察,以免壓碎標(biāo)本片和損壞鏡頭。
C、然后雙眼移至接目鏡,一面從接目鏡觀察,一面反方向緩慢地轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器(下降載物臺(tái),或上升鏡筒),當(dāng)出現(xiàn)模糊物象時(shí),換用細(xì)調(diào)節(jié)器,轉(zhuǎn)動(dòng)至物象清晰為止。
D、觀察完畢,應(yīng)先提高鏡筒,并將油鏡頭扭向一側(cè),再取下標(biāo)本片。油鏡頭使用后,應(yīng)立即用擦鏡紙擦凈鏡頭上的油。若鏡油粘稠干結(jié)于鏡頭上,可用擦鏡紙蘸少許二甲苯擦拭鏡頭,并隨即用干的鏡紙擦去殘存的二甲苯,以免二甲苯滲入,溶解用以粘固透鏡的膠質(zhì)物,造成鏡片移位或脫落
。



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