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如何修|煉成流式高手 - 樣本檢測(cè)

時(shí)間:2020-10-29 閱讀:1937
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新建自動(dòng)補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)

 

 

 

問(wèn)題來(lái)了,為什么調(diào)電壓就的重新補(bǔ)償?

 

熒光補(bǔ)償?shù)哪康木褪窍裏晒庖缏?duì)數(shù)據(jù)分析的復(fù)雜性,保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。從下面公式(以FITC溢漏到PE通道為例)可以看出,熒光溢漏(補(bǔ)償)的大小和平均熒光強(qiáng)度有直接關(guān)系,電壓gain值的大小又影響著MFI的大小。故電壓Gain的大小會(huì)直接影響熒光補(bǔ)償值的大小。

 

Tips:補(bǔ)償調(diào)節(jié)時(shí)要注意:使用未染色的細(xì)胞做PMT的電壓設(shè)置;不要使用未染色的補(bǔ)償微球設(shè)置電壓

 

 

 

CytoFLEX 支持在線及脫機(jī)調(diào)補(bǔ)償。多色應(yīng)用中,增加新的單染管到先前保存的補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)中,輕松實(shí)現(xiàn)全新補(bǔ)償矩陣的建立。并支持增益設(shè)置改變后,補(bǔ)償值自動(dòng)進(jìn)行修改,因此無(wú)需手動(dòng)調(diào)整補(bǔ)償。

 

在線根據(jù)增益轉(zhuǎn)換補(bǔ)償矩陣

 

QQ截圖20201026114754.png

 

從補(bǔ)償庫(kù)導(dǎo)入補(bǔ)償值-工作流程:

640 (6).png

從補(bǔ)償文件導(dǎo)入補(bǔ)償值:

 

 

檢測(cè)線性與補(bǔ)償

CytoFLEX平臺(tái)實(shí)測(cè)熒光強(qiáng)度與對(duì)應(yīng)檢測(cè)器增益設(shè)定值呈線性關(guān)系。調(diào)整增益時(shí),軟件自動(dòng)實(shí)時(shí)重新計(jì)算溢出值。半導(dǎo)體工藝可高度重現(xiàn),因此CytoFLEX平臺(tái)的實(shí)測(cè)熒光強(qiáng)度與對(duì)應(yīng)檢測(cè)器的增益設(shè)置成線性關(guān)系。而基于PMT檢測(cè)的非線性意味著需要根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)確定電壓。

 

 

QQ截圖20201029120020.png

 

 

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