上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司由資深專家?guī)ь^組建研發(fā)團(tuán)隊(duì)，十幾年ELISA試劑盒開(kāi)發(fā)經(jīng)驗(yàn)，品質(zhì)保障，值得信賴；BIM品牌試劑盒更是度高，已被國(guó)內(nèi)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，如北京生命科學(xué)研究所，中國(guó)科學(xué)院，協(xié)和醫(yī)科大學(xué)等；諸多刊物的文章廣泛引用，如Nature, PNAS, Cell Research, Biomaterials等，目前SCI文章及國(guó)內(nèi)核心期刊引用已達(dá)數(shù)百篇。專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供完備的售前及售后服務(wù)，確保您實(shí)驗(yàn)成功!我司來(lái)教您做實(shí)驗(yàn)有哪些步驟？

    操作步驟：
    1.|標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在第yi、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在第yi、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從第yi孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為24μg/L ，16μg/L， 8μg/L，4μg/L， 2μg/L）。

    2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

    3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

    4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

    5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

    6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

    7.溫育：操作同3。

    8.洗滌：操作同5。

 

    9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

    10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

    11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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