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溫習(xí)一下:這些不能忽略小細(xì)節(jié)千萬
閱讀:1214 發(fā)布時(shí)間:2018-4-3 大多數(shù)人在實(shí)驗(yàn)的過程中,是否都有過一些您明明知道,但卻總是不以為意的小細(xì)節(jié)呢?直到實(shí)驗(yàn)結(jié)果不太理想時(shí)才會(huì)想著去找那些原因,但是您我都知道這樣是不好的。所以為了引起您的重視,小編還是來給您再次溫習(xí)一下!
一 記錄
人的記憶力是有限的,在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,不可能記住做過的每一步。例如實(shí)驗(yàn)記錄如果不及時(shí)寫,第二天就會(huì)忘記很多,一周之后就*忘記了。所以做實(shí)驗(yàn)一定要做好實(shí)驗(yàn)記錄。記錄一要及時(shí),否則就會(huì)忘記,是隨時(shí)記錄。二要詳細(xì),因?yàn)橐粋€(gè)很小的細(xì)節(jié)可能就是實(shí)驗(yàn)失敗或者成功的原因,如果沒有記下這個(gè)細(xì)節(jié), 實(shí)驗(yàn)出問題了就難以找到原因。 例如做實(shí)驗(yàn)用的試劑是哪一瓶,什么時(shí)候配的(尤其是容易失效的試劑),如果是用 PBST 配的 5%BSA,加了0.02%的 Sodium Azide 抑制微生物生長(zhǎng),就應(yīng)該記錄為5%BSA.PBST.N3Na,而是5%BSA。三要整潔,如果過于潦草,看起來很不方便,需要找相關(guān)信息的時(shí)候就難以找到。配好的試劑做好標(biāo)簽也是一種記錄,標(biāo)簽一定要詳細(xì):包括試劑名稱、配置日期、配置者及其它必要信息。在配試劑的時(shí)候,為了防止忘記貼標(biāo)簽的情況,應(yīng)該先貼標(biāo)簽,再加試劑。電子記錄有易于檢索的優(yōu)點(diǎn),對(duì)于某些重要信息,可以記錄到電子文檔(例如 word 文檔)里面。
二 核查
很多時(shí)候,我實(shí)驗(yàn)失敗的原因是沒有仔細(xì)核查,例如沒有核查果蠅的表型,沒有仔細(xì)檢查試劑的標(biāo)簽,沒有核查離心機(jī)的轉(zhuǎn)速,沒有檢查 heat block 的溫度等等。每一個(gè)小錯(cuò)誤都可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,所以一定要養(yǎng)成仔細(xì)核查的習(xí)慣。具體來說,在加試劑的時(shí)候,一定要仔細(xì)核查標(biāo)簽(包括試劑名稱、 配置日期),是否有沉淀,顏色是否改變等;使用儀器的時(shí)候, 要核查設(shè)置, 例如溫度、 轉(zhuǎn)速、 時(shí)間設(shè)置等; 電泳的時(shí)候, 要核查是否有氣泡冒出; 使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的時(shí)候,要核查表型等。
三 分裝
諺語說:不要把所有雞蛋都放到同一個(gè)籃子里。同樣,在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,有時(shí)也不要 把所有試劑都放到同一個(gè)容器里。分裝有很多好處。*,保險(xiǎn)??梢苑乐挂?yàn)槲廴?、變質(zhì)等原因損失全部試劑或者樣品。第二,容易混勻。結(jié)冰的試劑需要全部溶解然后 vortex 才可以混勻,如果很大體積,有時(shí)會(huì)等不及全部溶解 就開始加樣,會(huì)導(dǎo)致濃度不均。一般 溶液都是先溶解溶質(zhì)濃度高的,就像是結(jié)冰的汽水一邊融化一邊喝,一開始很甜,zui后幾乎 沒有甜味了,是因?yàn)樘欠莸拇嬖跁?huì)降 低熔點(diǎn),含糖量高的先溶解了。分裝后,每一管溶液 量小,解凍時(shí)容易全部溶解。注意在分裝的時(shí)候一定要全部溶解并充分混勻。第三,延長(zhǎng)保質(zhì)期。很多試劑都要低溫保存。如果不分裝,每次使用的時(shí)候都全部受熱一次,變質(zhì)就會(huì)很快。分裝之后,每次使用只有少量試劑受熱,其它的還可以繼續(xù)保持于低溫,可以延長(zhǎng)使用壽 命??贵w、體積較大的酶、熱不穩(wěn)定的其它試劑等分裝保存于-20 度或者更低的溫度。
四 混勻?qū)嶒?yàn)對(duì)很多試劑的用量都有明確要求。要保證實(shí)驗(yàn)的成功和可重復(fù)性,必須保證試劑用量一致。用量等于體積乘以濃度,如果溶液不混勻的話,濃度就會(huì)不同,即使加樣體積一樣,實(shí)際的量也可能不一樣。所以,一定要保證試劑是充分混勻。結(jié)冰的試劑,必須*溶解才可以使用。 容易沉淀的試劑, 使用之前必須充分vortex 后再快速離心一下才能使用。
五 備份
在《At the bench》一書里,作者說如果實(shí)驗(yàn)室發(fā)生起火等危急情況,首先應(yīng)該搶救的不是試劑,而是實(shí)驗(yàn)記錄。因?yàn)橛辛藢?shí)驗(yàn)記錄才可以完成論文。其實(shí),為了防止實(shí)驗(yàn)記錄丟失的情況,可以把實(shí)驗(yàn)記錄掃描為PDF文檔以備份。同時(shí),對(duì)于重要的研究數(shù)據(jù),整理成電子文檔例如 excel 或 word 文檔,并且養(yǎng)成對(duì)自己的電腦文件定期備份的習(xí)慣。此外,質(zhì)粒、轉(zhuǎn)化后的細(xì)菌也需要備份。備份兩份以降低丟失的概率。