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酶標法檢測真菌毒素科研發(fā)展
閱讀:1698 發(fā)布時間:2012-11-12
酶標法檢測真菌毒素科研發(fā)展
真菌毒素簡介:
真菌毒素是真菌在食品或飼料里生長所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,對人類和動物都有害。真菌毒素造成中毒的zui早記載是11世紀歐洲的麥角中毒,這種中毒的臨床癥狀曾在中世紀的圣像畫中描述過。由于麥角菌的菌核中會形成有毒的生物堿,所以這種疾病至今仍稱為麥角中毒。急性麥角中毒的癥狀是產(chǎn)生幻覺和肌肉痙攣,進而發(fā)展為四肢動脈的持續(xù)性變窄而發(fā)生壞死。
酶聯(lián)免疫吸附法 enzyme linked immunosorbant assay,ELISA 簡稱酶標法。具體方法很多。...1加入酶聯(lián)抗抗體(抗人γ球蛋白抗體),使它與已吸附的抗原和抗體的復合物相結(jié)合,再洗3次,以除去未吸附的酶聯(lián)抗抗體;2加入該酶的底物,使底物分解并產(chǎn)生顏色,待終止反應(yīng)后,依底物顏色深淺,即可知樣品中的抗體含量。酶聯(lián)免疫吸附試驗(EIISA)具有靈敏、操作簡便、樣品前處理無需凈化(或只需zui小限度的凈化)、樣品處理量大的優(yōu)點,是分析真菌毒素的重要方法。超臨界流體色譜法主要用于DON、T一2毒素和ZEN等鐮刀菌毒素的檢測;毛細管電動色譜廣泛用于同時檢測多種真菌毒素,其優(yōu)點是樣品用量少、節(jié)省提取溶劑、使用價格低廉的毛細管柱等。
酶聯(lián)免疫吸附試驗優(yōu)點:
酶聯(lián)免疫吸附試驗(EIISA)是分析真菌毒素的重要方法,具有靈敏、操作簡便、樣品前處理無需凈化(或只需zui小限度的凈化)、樣品處理量大的優(yōu)點。
目前已建立多種分析各類農(nóng)產(chǎn)品和食品中真菌毒素的EuSA方法。AOAC頒布了供內(nèi)部機構(gòu)使用的檢測糧食及其他農(nóng)產(chǎn)品中桔青霉素、圓弧偶氮酸和麥角堿的ELISA方法。上檢測糧油食品中多種真菌毒素(包括AFs、AFBl、AFMl、OTA、伏馬菌素、T一2毒素、DON、ZEN、桔青霉素等)商品化的ELISA試劑盒已被廣泛用于實際工作中。
酶標法檢測真菌毒素發(fā)展:
超臨界流體色譜法(supercritical fluid chromatography)和毛細管電動色譜(capillary e,lectrokinetic chromatography)配激發(fā)光子束熒光檢測(multiphotonexcited fluorescence)是分離檢測真菌毒素的另外兩種技術(shù)。前者主要用于DON、T一2毒素和ZEN等鐮刀菌毒素的檢測;后者廣泛用于同時檢測多種真菌毒素,其優(yōu)點是樣品用量少、節(jié)省提取溶劑、使用價格低廉的毛細管柱等。
逆流膠束電動色譜(reversed flow micellar eleetrokinetic chromatographv)也。用于檢測玉米粗粉中的AFBl、AFB2、AFGi和AFG2。毛細管電泳法(capillarvelectrophoresis)被用于檢測黑麥中的麥角堿;玉米和飼料中的伏馬菌素;烘烤咖啡、玉米和高粱中的OTA等,檢測限可達0.2ug/kg。
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